《中國生物制品規(guī)程》 吸附百日咳菌苗、白喉、破傷風(fēng)類毒素混合制劑制造及檢定規(guī)程

本品系由百日咳菌苗原液、精制白喉類毒素及精制破傷風(fēng)類毒素用氫氧化鋁吸附制成。供兒童預(yù)防百日咳、白喉及破傷風(fēng)之用。

1　抗原要求

1.1　百日咳菌苗原液應(yīng)符合附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》中2.4項的規(guī)定。

1.2　精制白喉類毒素應(yīng)符合《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規(guī)程》中4項的要求。

1.3　精制破傷風(fēng)類毒素應(yīng)符合《吸附精制破傷風(fēng)類毒素制造及檢定規(guī)程》中4項的要求。

2　制造

2.1　配方

每ml制劑中各種抗原成份含量如下：

百日咳菌45億～90億

精制白喉類毒素20Lf

精制破傷風(fēng)類毒素5Lf

2.2　吸附劑配制，見《吸附精制破傷風(fēng)類毒素制造及檢定規(guī)程》5項。

2.3　氫氧化鋁稀釋

以蒸餾水按吸附后之總量將氫氧化鋁原液稀釋成1.0～1.5mg　/ml。硫柳汞含量不超過0.01%（g　/ml），氯化鈉含量補(bǔ)足至0.85%（g　/ml），高壓蒸汽滅菌。

2.4　吸附

按計算量將精制白喉類毒素、精制破傷風(fēng)類素及百日咳菌苗原液加入稀釋好的吸附劑內(nèi)。調(diào)節(jié)pH至5.8～7.2。

2.5　分批

同批吸附劑同批配合的原液同次吸附的制品為1批。如用大罐吸附時，所用抗原和吸附劑可以多批混合（精制類毒素不超過3批），每罐為1批。

3　成品檢定

3.1　物理化學(xué)檢查

3.1.1　振搖后應(yīng)呈均勻乳白色混懸液。不應(yīng)有搖不散的凝塊或異物。

3.1.2pH值應(yīng)為5.8～7.2。

3.1.3　氯化鈉含量為0.75%～0.9%(g　/ml)。

3.1.4　硫柳汞含量為1.0%～0.5%(mg　/ml)。

3.1.5　硫柳汞含量不超過0.01%(g　/ml)。

3.2　鑒別試驗

抽取樣品，另枸櫞酸鈉或用其他適宜方法將吸附劑溶解后，離心沉淀百日咳菌體和殘留的吸附劑，按《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規(guī)程》中7.6項、《吸附精制破傷風(fēng)類毒素制造及檢定規(guī)程》中7.6項和附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》中2.4.3項進(jìn)行鑒別試驗。

3.3　無菌試驗

按《生物制品無菌試驗規(guī)程》進(jìn)行。

3.4　毒性試驗

應(yīng)符合附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》中2.4.5項的規(guī)定。

3.5　安全試驗

3.5.1　小白鼠法

用體重18～20g之健康小白鼠5只，每只皮下注射檢品0.5ml觀察7日，不得有局部膿腫或死亡。

3.5.2　豚鼠法

用體得300～400g豚鼠，每批制品不少于4只，每只皮下注射2.5ml，分兩側(cè)，每側(cè)1.25ml，應(yīng)符合《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規(guī)程》中4.4項及《吸附精制破傷風(fēng)類毒素制造及檢定規(guī)程》中4.5項要求。

3.6　效力試驗

3.6.1　百日咳菌苗免疫力試驗

每3批抽1批進(jìn)行，應(yīng)符合附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》中1.2.5項的規(guī)定。

3.6.2　白喉及破傷風(fēng)類毒素的效力試驗

每更換1批類毒素時進(jìn)行。取體重300～400g豚鼠4只，每只皮下注射0.5ml，第30天采血，將分離的血清等量混合，進(jìn)行白喉及破傷風(fēng)抗毒素單位測定。

3.6.2.1　白喉抗毒素單位測定

用Lr　/300家兔皮內(nèi)法，要求每ml血清達(dá)到0.25IU。

3.6.2.2　破傷風(fēng)抗毒素單位測定

用L+/100小白鼠皮下法，要求每ml血清達(dá)到0.5IU。

3.6.2.3　白喉類毒素的效力試驗亦可采用攻毒法。取體重300～350g豚鼠5只以上，每只皮下注射0.5ml。第30天各皮下攻擊白喉毒素200個MLD，觀察7天，豚鼠死亡不得超過20%；同時另取體重240～270g豚鼠3只，各皮下注射1個MLD毒素作為對照，2只對照豚鼠應(yīng)發(fā)病并于96小時內(nèi)死亡，允許另1只較晚死亡或發(fā)病。

3.6.2.4　亦可按WHO推薦的效力檢定方法（見《吸附精制白喉類毒素制造及檢定規(guī)程》附錄和《吸附精制破傷風(fēng)類毒素制造及檢定規(guī)程》附錄）。

4　保存與效期

應(yīng)保存于2～8℃。自吸附之日起效期為1年半。