《中國生物制品規(guī)程》 治療用布氏菌病菌苗制造及檢定規(guī)程

本品系用弱毒牛型布氏菌經(jīng)加熱殺菌制成。專供治療亞急性、慢性布氏菌病使用。

1　菌種

有關(guān)菌種的規(guī)定及菌種檢定按《凍干皮上劃痕人用布氏菌病活菌苗制造及檢定規(guī)程》1.1～1.4項(xiàng)及1.5.1～1.5.5項(xiàng)執(zhí)行。

2　制造

2.1　可用肝浸液瓊脂或其他適宜培養(yǎng)基制造。

2.2　啟開凍干菌種，接種于肝瓊脂斜面或其他適宜培養(yǎng)基上，37℃培育44～48小時為第1代菌種。第1代菌種在2～8℃可以保存15日。

2.3　將第1代菌種移種肝瓊脂或其他適宜培養(yǎng)基上，放37℃培育44～48小時，為第2代菌種，經(jīng)肉眼純菌檢查合格后，用滅菌生理鹽水洗下菌苔制成懸液。

2.4　用第2代菌懸液接種肝瓊脂或其他適宜培養(yǎng)基，放37℃培育44～48小時，肉眼逐瓶檢查，有雜菌者廢棄。

2.5　用滅菌生理鹽水洗下菌苔或刮取菌苔，制成菌液。用綢布袋過濾，合并至滅菌瓶內(nèi)。

2.6　合并后菌液按中國細(xì)菌濁度標(biāo)準(zhǔn)將菌液的濃度調(diào)為每ml含150億～300億菌，隨后放70～80℃水浴搖動1小時殺菌。

2.7　無菌試驗(yàn)

除按《生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行外，另接種2管肝瓊脂斜面，放37℃培育7天，應(yīng)無雜菌及本菌生長。

2.8　用滅菌生理鹽水將無菌試驗(yàn)合格的菌液稀釋為含菌30億/ml，稀釋后應(yīng)取樣做無菌試驗(yàn)，不應(yīng)有菌生長。

2.9　菌苗內(nèi)不加防腐劑。稀釋菌液分裝安瓿后應(yīng)加熱70～80℃1小時。

3　成品檢定

3.1　物理性狀檢查

菌苗應(yīng)呈均勻菌懸液，無搖不散的菌塊及異物。

3.2　無菌試驗(yàn)

按《生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。

3.3　濃度測定

按中國細(xì)菌濁度標(biāo)準(zhǔn)測定。每ml含菌30億±20%。

3.4　鑒別試驗(yàn)

菌苗應(yīng)與布氏菌診斷血清發(fā)生凝集反應(yīng)。

3.5　安全試驗(yàn)

每批菌苗用體重18～20g小白鼠5只，每只皮下注射0.5ml，注射后7日內(nèi)小白鼠不得有死亡。凡有死亡者應(yīng)復(fù)試，仍有死亡者則該批菌苗應(yīng)廢棄。

4　保存與效期

應(yīng)保存于2～8℃。自檢定合格之日起效期為2年。