舌苔形成機制的現(xiàn)代研究進展

近年來，國內(nèi)學(xué)者利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段對舌苔的形成進行了廣泛的研究，例如舌苔的細胞形態(tài)學(xué)、正常和病理舌苔的電子顯微鏡研究、舌苔生物化學(xué)、苔色變化、舌質(zhì)微循環(huán)、血液流變學(xué)、免疫學(xué)以及舌苔脫落細胞、舌苔與正常菌群、溶菌酶等。研究發(fā)現(xiàn)，舌苔形成與表皮生長因子以及舌苔上皮細胞中的促凋基因Bax、Fas、TGF-β3等有關(guān)。并且，舌苔的形成還與神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)有關(guān)。1形態(tài)學(xué)研究 對舌苔的形態(tài)學(xué)研究包括生理、病理狀態(tài)下從定性到定量的研究。健康人正常舌苔薄白苔由絲狀乳頭分化的角化樹與填充其間的脫落上皮細胞、唾液、細菌、食物碎屑、滲出的白細胞等組成。厚苔的形成與舌上皮增殖加速、細胞退化延遲、剝脫減慢等密切相關(guān)。而剝苔是由于體內(nèi)各種原因?qū)е律嗌掀そ琴|(zhì)化過程發(fā)生障礙，缺乏次級乳頭以及表面細胞黏著力減低而形成的一種特殊舌象。正常人舌苔脫落細胞代謝處于相對平衡狀態(tài)，在細胞形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為角化細胞居多，而完全角化細胞、角化前細胞相對較少，幾乎沒有中層細胞。在病理狀態(tài)下，舌苔脫落細胞有相應(yīng)的形態(tài)學(xué)改變。王莉等研究發(fā)現(xiàn)，厚苔脫落細胞涂片背景多較雜亂，角化細胞、白細胞、細菌明顯增多；而剝苔則背景多較清晰，上皮細胞、白細胞數(shù)量減少，有時可見到較多中層細胞，并且發(fā)現(xiàn)細胞的角化程度及分布與苔色關(guān)系不明顯。楊振江等發(fā)現(xiàn)食管癌患者中薄白苔脫落細胞以角化前細胞增多為主；黃苔脫落細胞(包括薄黃和黃膩苔)則以完全角化細胞增多為主；剝苔脫落細胞也以完全角化細胞增多為主，且亦多見中層細胞；白膩和白厚苔脫落細胞則角化前和完全角化細胞均增多。微核是染色體受損后的斷片或有絲分裂后期滯后的染色體。周璇等對正?？谇火つゎa部、舌背、舌腹三個部位進行的脫落細胞微核計數(shù)的分析表明，舌背細胞的角化程度高，完全角化細胞相對較多，且位于上皮的表層，抵抗各種外界刺激，保護下層細胞，因而有核的不全角化細胞、角化前細胞等受到的局部刺激及染色體損傷相對較少，反映在微核數(shù)上就偏低。為了避免在對各類細胞觀察中的主觀性，提高舌苔脫落細胞形態(tài)學(xué)研究的客觀性，建立舌苔脫落細胞形態(tài)計量參數(shù)變化的量化標準，張平等對正常人舌脫落上皮細胞進行形態(tài)計量學(xué)檢測，獲得了正常人舌脫落細胞中不同細胞的形態(tài)計量學(xué)參數(shù)及總體細胞形態(tài)計量學(xué)參數(shù)值的頻率分布圖，使量化的細胞形態(tài)特征具體化，便于直觀比較，為今后對舌象變化的脫落細胞機理研究打下基礎(chǔ)。進一步的比較研究發(fā)現(xiàn)，黃膩苔脫落細胞的平均面積、周長、等效直徑及最大直徑均小于正常舌苔脫落細胞，且前者的總體細胞中面積或最大直徑不同的細胞比例發(fā)生了明顯變化，認為黃膩苔脫落細胞外形與正常舌苔相似，而直徑、面積較小的細胞增多，直徑、面積較大的細胞減少，從而導(dǎo)致其平均面積和平均直徑減小。2生物化學(xué)研究 研究舌苔脫落細胞的生物化學(xué)特征對揭示舌苔的形成機制及舌苔的臨床病理意義有著重要作用。舌上皮細胞代謝旺盛，角化層細胞及時脫落，即表現(xiàn)為正常的薄潤舌苔。如果代謝異常，或增強或減弱，角化層細胞就會角化不全或脫落延遲，附著于舌背表面即形成異常厚苔。舌上皮細胞的分裂、分化、移行與細胞角化脫落之間的動態(tài)平衡及口腔pH值改變是舌苔消長變化的重要因素。袁肇凱對健康人薄白苔和患者薄苔、厚苔、剝苔舌脫落細胞、舌面酸堿度進行檢測，結(jié)果健康薄白苔組和病理薄苔組舌面pH值呈中性或弱堿性，而病理厚苔組和剝苔組則呈偏酸性，尤以剝苔組患者明顯。在病理條件下，口腔細菌過度繁殖，造成酸性環(huán)境，致細胞間的黏著力增強，阻礙了角化上皮細胞的正常脫落，故舌苔增厚；酸度增加到一定水平，還會同時影響舌上皮血液供應(yīng)，致使舌上皮細胞營養(yǎng)代謝障礙，細胞角化受阻，從而過早變性、壞死，導(dǎo)致舌苔剝落。細胞內(nèi)含有大量與代謝相關(guān)的大分子物質(zhì)和酶，通過對其含量的測定分析，可以了解各種舌苔脫落細胞的代謝水平，間接地反映機體的生理狀況，具有較好的客觀性。吳正治等利用細胞化學(xué)的方法對常見舌苔的舌上皮細胞內(nèi)7種成分進行分析的結(jié)果提示，舌苔正常時舌上皮細胞的新陳代謝較旺盛，這種旺盛的代謝狀態(tài)與cAMP、cGMP有關(guān)，也與唾液皮質(zhì)醇水平、鐵鋅元素含量及pH值有關(guān)。在上述研究的基礎(chǔ)上，李新華等運用顯微分光光度技術(shù)，對病理白苔、黃苔與正常舌苔舌上皮細胞內(nèi)7項化學(xué)指標的含量按辨證分型進行了比較，結(jié)果病理白苔組細胞內(nèi)氧化水平低下，細胞分化、退化和溶解相對緩慢，病理黃苔組舌上皮的生物氧化處于亢進狀態(tài)，白苔、黃苔有各自不同的細胞學(xué)變化特點，并與辨證結(jié)果基本一致。3血液流變學(xué) 血液流變學(xué)指標異常與病理舌苔的形成有關(guān)。劉夕茹觀察高黏滯血癥(HVS)的血液流變學(xué)特征與舌診的關(guān)系，結(jié)果，復(fù)合性HVS較單純性HVS異常舌苔出現(xiàn)機率增加，治療后隨著血液流變學(xué)指標改善，舌苔也部分好轉(zhuǎn)。從而說明異常舌象的發(fā)生，可由一個或多個黏滯因素協(xié)同為患。4舌苔脫落細胞成熟指數(shù)、成熟價值研究 舌苔脫落細胞成熟指數(shù)(MI)和成熟價值(MV)作為舌苔脫落細胞的病理生理學(xué)指標，能反映舌苔上皮細胞的成熟情況和舌苔的病理狀態(tài)。在對小兒舌苔脫落細胞進行的MV、MI以及其它評估中發(fā)現(xiàn)，正常組各項指數(shù)均高于疾病組，正常組以表層細胞為主，疾病組則中層細胞增多，且MV明顯低于正常組。疾病組中呼吸道感染組各項指數(shù)均明顯高于腸炎組，但隨著感染加重各項指數(shù)降低，與腸炎組相近。因而認為小兒患病時其舌上皮細胞的成熟受到明顯影響。李燦東等對不同系統(tǒng)疾病患者和健康對照者舌印片進行脫落細胞學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，各疾病組舌印片的MI、MV等指標與對照組間有非常顯著的差異，主要表現(xiàn)為疾病組中層細胞增多，MV減小，胃腸道疾病組和泌尿系統(tǒng)疾病組MI、MV改變最為明顯。紫暗舌及膩苔、剝苔的MV、MI變化最為顯著，而且疾病組淡紅舌、薄白苔的MV、MI明顯低于對照組。因此認為這兩項指標的變化可以作為舌診綜合研究的指標之一。進一步觀察發(fā)現(xiàn)，慢性萎縮性胃炎脾虛濕蘊型患者的舌脫落細胞表層細胞MI、MV均明顯低于正常組，表明慢性萎縮性胃炎患者的舌上皮細胞成熟受到明顯的影響。5表皮生長因子研究 現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，舌苔的增厚與表皮生長因子(EGF)的增加有關(guān)，EGF可以明顯促進上皮細胞的角化。對腫瘤患者舌苔變化與EGF關(guān)系的研究中發(fā)現(xiàn)，舌苔的厚薄與唾液中EGF的含量有關(guān)。為進一步了解EGF影響舌苔形成的機制，周坤福等通過皮下注射EGF觀察小鼠舌上皮細胞生長和EGF-R的表達。結(jié)果提示，EGF是消化道分泌的一種能影響舌苔形成的因子，通過EGF-R機制影響舌苔形成。舌黏膜上皮為復(fù)層扁平(鱗狀)上皮，可分為基底細胞層、棘細胞層和表層三種結(jié)構(gòu)。每一細胞增殖周期包括Gl期、S期、G2期、M期，細胞在正常情況下沿著上述路線運行。陸平成等采用熒光標記單克隆抗體流式細胞儀測定方法，探討EGF促進舌苔增厚的機理。結(jié)果表明，EGF可以促進細胞角蛋白的表達。舌苔的厚薄與舌上皮細胞的角化有關(guān)，一般光剝少苔之舌，角化細胞及不全角化細胞均減少，外基底層細胞或中間細胞的比數(shù)則增多，而舌苔厚者，涂片上一般角化細胞及不全角化細胞的比數(shù)較大?，F(xiàn)代研究表明，EGF可以明顯促進上皮細胞的角化，這可能是腫瘤患者舌苔厚薄與唾液中EGF含量高低呈正相關(guān)的原因之一，EGF的增加與舌苔的增厚有關(guān)。是否可以利用舌苔來進一步判斷腫瘤的預(yù)后，值得深入研究。6神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò) 吳正治等測定了七種舌苔的植物神經(jīng)平衡指數(shù)(該指數(shù)值愈大提示交感神經(jīng)系統(tǒng)愈活躍)，結(jié)果顯示，各類舌苔的平衡指數(shù)按病理虛寒薄白、正常、薄黃、白厚、花剝依次增加，說明舌苔的變化與植物神經(jīng)平衡狀態(tài)有關(guān)。尤昭玲等檢測婦女舌苔脫落細胞的LDH在月經(jīng)周期不同時相中的動態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)月經(jīng)后期LDH活性變化曲線明顯偏移，認為舌苔細胞LDH特殊曲線變化與雌激素水平不足、功能失調(diào)有關(guān)。李新華等觀察了六種舌苔患者的紅細胞免疫功能及淋巴細胞酸性-α-醋酸萘酯酶(L-ANAE)活性，結(jié)果，除黃苔組外各組紅細胞C3b受體花環(huán)率(RCR)均顯著低于正常組，虛寒薄白苔組免疫復(fù)合物花環(huán)率(RICR)顯著低于正常組，各組L-ANAE顯著低于正常組，表明RCR、RICR、L-ANAE可以作為舌診(尤其是虛寒薄白苔)的客觀指標之一。7細胞凋亡研究 細胞凋亡是維持機體正常生理功能和自身穩(wěn)定的重要手段，與個體發(fā)育、免疫及多種疾病有關(guān)，參與機體多種生理、病理過程，如胚胎發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)、衰老過程、腫瘤發(fā)生等。舌苔厚度與細胞凋亡指數(shù)(即凋亡細胞占所有細胞百分比)有一定關(guān)系。在復(fù)層扁平上皮中，上皮角質(zhì)形成細胞通過調(diào)節(jié)其增殖、分化、凋亡的過程來維持表皮結(jié)構(gòu)的動態(tài)平衡。劉文蘭等發(fā)現(xiàn)，絲狀乳頭復(fù)層鱗狀上皮細胞在終末分化過程中部分細胞發(fā)生凋亡，表明舌苔厚度與細胞凋亡指數(shù)有一定關(guān)系。在急性呼吸系統(tǒng)感染疾病患者中，中等厚度舌苔者細胞凋亡指數(shù)顯著大于其它厚度舌苔者。認為舌苔中等厚度時，患者狀況處于一個相對穩(wěn)定的狀態(tài)，在此階段機體力爭調(diào)動自身力量來恢復(fù)正常平衡穩(wěn)定的狀態(tài)。在中等厚度以上舌苔組，雖然凋亡細胞的絕對數(shù)量增多，但由于此階段體溫很高，基底細胞增生活躍占優(yōu)勢，細胞總數(shù)量明顯增加，從而使細胞凋亡指數(shù)降低，甚至略低于薄苔。從而認為，祛邪中藥使舌苔由厚變薄，可能是通過誘導(dǎo)舌苔細胞的凋亡而起作用的。8促凋亡基因研究 近年來，隨著運用細胞凋亡理論對舌苔變化機理研究的深入，發(fā)現(xiàn)正常表皮細胞依靠生長、分化、凋亡處于相對平衡的狀態(tài)而維持生理功能。細胞凋亡是由基因控制的細胞主動死亡過程，目前發(fā)現(xiàn)與上皮組織有關(guān)的促凋亡基因有TGF-β、Fas、Bcl-2、Bax等。TGF-β是一類多效能細胞因子，在人體內(nèi)有TGF-βl、TGF-β2、TGF-β3三種同源異構(gòu)體，其中TGF-β1和TGF-β2在表皮基底層附近表達較豐富，TGF-β3在顆粒層表達較多，TGF-β促進上皮細胞凋亡，對其生長、分化起負調(diào)節(jié)作用，可將細胞阻抑于細胞周期Gl期。Fas介導(dǎo)的凋亡過程對維持上皮正常生理功能及皮膚損傷修復(fù)等方面有重要的作用。Bcl-2是原癌基因的一種，實驗數(shù)據(jù)表明它可抑制多種因子激發(fā)的細胞凋亡，延長細胞壽命，但不能刺激細胞增殖。Bax與Bcl-2各自可形成同源二聚體，也可相互作用為異源二聚體，兩者之間的比例決定細胞的命運。當(dāng)細胞中Bax蛋白高表達時形成同源二聚體，可促進細胞凋亡，當(dāng)Bcl-2蛋白高表達時則形成Bcl-2／Bax異二聚體，抑制細胞凋亡。吳正治等運用TUNEL技術(shù)檢測舌苔上皮細胞凋亡情況，以及運用原位核酸分子雜交、免疫組織化學(xué)技術(shù)對凋亡相關(guān)基因Bax、Fas、TGF-β3在正常及常見病理舌苔上皮細胞中的mRNA轉(zhuǎn)錄水平及蛋白產(chǎn)物進行測定，結(jié)果提示，凋亡相關(guān)基因Bax、Fas、TGF-β3表達水平的變化可能是影響舌苔上皮細胞凋亡并導(dǎo)致舌苔厚度變化的重要原因。9結(jié)語 舌苔形成機制的現(xiàn)代研究主要集中體現(xiàn)在細胞形態(tài)和細胞生化兩方面，以進一步揭示其與臨床診斷、治療的內(nèi)在聯(lián)系。隨著科技的發(fā)展，舌診的研究正向著客觀化、微觀化方向發(fā)展。目前從多個層次上對舌苔形成機制的探索，已深入到亞細胞和細胞代謝水平，在基因分子水平研究舌苔原理已有所突破，必隨著分子生物學(xué)的發(fā)展而深入。目前研究的方法日趨多樣化，手段更加先進，以避免研究中可能存在的某些主觀臆測性。從細胞凋亡、酶的代謝、細胞微核計數(shù)、細胞因子、激素調(diào)控等方面繼續(xù)深入研究，將有助于舌診的客觀化、定量化、標準化和規(guī)范化。摘自：《國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊》文/陳 群 徐志偉 武哲麗 鐘鴻