腦力智寶對(duì)乳鼠腦神經(jīng)細(xì)胞有營(yíng)養(yǎng)作用

《中國(guó)臨床康復(fù)》2004年第8卷第34期報(bào)道了首都醫(yī)科大學(xué)北京神經(jīng)科學(xué)研究所包金風(fēng)、廣州中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)基礎(chǔ)教研室張曉文等對(duì)中藥腦力智寶對(duì)乳鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞和PC12細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的影響的研究報(bào)告。

腦力智寶是由益智仁、龜甲、枸杞子、石菖蒲、核桃仁、當(dāng)歸、遠(yuǎn)志、紅花等組成的中藥復(fù)方，臨床和實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)其具有增強(qiáng)神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）受體表達(dá)、促進(jìn)兒童智力發(fā)育、改善大腦微循環(huán)和腦能量代謝、提高腦內(nèi)RNA含量，促進(jìn)腦內(nèi)蛋白質(zhì)的合成及促進(jìn)多巴胺能神經(jīng)功能等作用。

方法：將SD大鼠分為腦力智寶提取物高劑量組（0.63g/L）、低劑量組（0.04g/L）和對(duì)照組，連續(xù)給藥7次后眼球取血制備含藥血清，用MTT法檢測(cè)腦力智寶對(duì)原代培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的影響；用分散培養(yǎng)法培養(yǎng)PC12細(xì)胞，測(cè)定加入不同濃度腦力智寶提取物(0.63和0.04g/L)、腦力智寶含藥血清（6和3g/kg）、神經(jīng)生長(zhǎng)因子后PC12細(xì)胞在24、48和72小時(shí)的突起陽(yáng)性細(xì)胞百分比。

結(jié)果證實(shí)： 腦力智寶對(duì)PC12細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)作用，使細(xì)胞突起增加增長(zhǎng)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多，48小時(shí)時(shí)0.63g/L腦力智寶提取物可使陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)從模型組的17.2％提高到38.4％（t=4.89，P<0.01），3g/kg腦力智寶含藥血清可使陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)達(dá)到69.0％（t=9.37，P<0.01），并可促進(jìn)原代培養(yǎng)鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，MTT法檢測(cè)A值明顯增加，尤以0.63g/L腦力智寶提取物組和3g/kg腦力智寶組作用明顯。0.63g/L腦力智寶提取物可顯著促進(jìn)PC12細(xì)胞增殖，細(xì)胞數(shù)目較對(duì)照組分別增加，差異均有顯著性意義（t=2.67，5.27，3.12；P<0.05～0.01），均與對(duì)照組比較有顯著性差異；6g/kg含藥血清組亦顯著增加。腦力智寶提取物和含藥血清均可促進(jìn)無(wú)血清培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞軸突生長(zhǎng)，對(duì)原代培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞均具有促進(jìn)生長(zhǎng)作用，使突起陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加。

研究人員指出，在神經(jīng)元發(fā)育和再生過程中，神經(jīng)軸突的延長(zhǎng)和引導(dǎo)是其主要特征，神經(jīng)元的突起是研究腦發(fā)育和退化的重要指標(biāo)，NGF對(duì)神經(jīng)元的營(yíng)養(yǎng)支持起重要作用，若缺乏NGF的營(yíng)養(yǎng)支持，將引起神經(jīng)元的早衰和老年性癡呆的發(fā)生。PC12細(xì)胞是研究神經(jīng)元軸突生長(zhǎng)發(fā)育的理想細(xì)胞模型，其具有NGF的核受體，NGF可誘導(dǎo)PC12細(xì)胞的分化從不斷增殖生長(zhǎng)狀態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)變成具有軸突等交感神經(jīng)元特征的終末分化細(xì)胞。目前研究細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)作用有關(guān)的體外實(shí)驗(yàn)皆采用無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞的方法，以消除血清中一些其他營(yíng)養(yǎng)因素的影響，但由于原代培養(yǎng)的神經(jīng)元體外不易存活，故本實(shí)驗(yàn)采用血清培養(yǎng)然后轉(zhuǎn)為無(wú)血清培養(yǎng)的方法。

本研究表明，腦力智寶在一定范圍內(nèi)能促進(jìn)PC12細(xì)胞的增殖，呈較好的量效關(guān)系，形態(tài)學(xué)觀察腦力智寶對(duì)PC12細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)作用，使細(xì)胞突起增加增長(zhǎng)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多，48小時(shí)時(shí)0.63g/L腦力智寶提取物可使陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)從模型組的17.2％提高到38.4％，3g/kg，腦力智寶含藥血清可使陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)達(dá)到69.0％，并能夠促進(jìn)原代培養(yǎng)的鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育的作用，MTT法檢測(cè)A值明顯增加，尤以0.63g/L腦力智寶提取物和3g/kg腦力智寶含藥血清組作用明顯。表明腦力智寶確含有對(duì)神經(jīng)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)作用的有效成分。推測(cè)可能腦力智寶除具有NGF受體激動(dòng)作用外，其所含有的一些成分本身就具有促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的作用。另外，該藥中益智仁含有的益智醇具有鈣調(diào)節(jié)作用，而鈣在NGF合成過程中起著第二信使的作用。有文獻(xiàn)報(bào)道當(dāng)歸對(duì)坐骨神經(jīng)損傷后的再生具有促進(jìn)作用，推測(cè)可能腦力智寶除具有NGF受體激動(dòng)作用外，其所含成分可能具有促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的作用，其作用機(jī)制尚待進(jìn)一步探討。