北京協(xié)和醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)艾滋病病情差異原因

北京協(xié)和醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)艾滋病病情差異原因

——HLA-Bw6/Bw6純合基因加速患者疾病進(jìn)程

2006年02月20日 我國(guó)學(xué)者日前正式宣布HLA-Bw6/Bw6純合基因是加速艾滋病進(jìn)程的“罪魁禍?zhǔn)住?，這一創(chuàng)新研究是由北京協(xié)和醫(yī)院感染科艾滋病診療中心李太生教授等完成的，論文發(fā)表在國(guó)際著名醫(yī)學(xué)雜志《艾滋病雜志》(JAIDS)今年第一期上。

研究艾滋病的學(xué)者們發(fā)現(xiàn)，艾滋病病毒（HIV）感染者的疾病發(fā)展進(jìn)程事實(shí)上在不同人群中有著顯著差距。95%以上的HIV感染者所遭受的病毒破壞力是強(qiáng)大而不可抗拒的，他們?cè)诟腥竞蟮?~10年紛紛出現(xiàn)反復(fù)難愈的感染、腫瘤和全身性的消耗，最終在痛苦絕望中走到生命的盡頭，這類(lèi)患者被稱(chēng)為典型的疾病進(jìn)程者（TP）。相反卻有不到5%的HIV感染者，在感染后10年內(nèi)疾病沒(méi)有進(jìn)展，沒(méi)有出現(xiàn)任何上述癥狀，其血清中病毒含量很弱，從未接受任何抗病毒治療，生活質(zhì)量能像正常人一樣，這類(lèi)患者被稱(chēng)為長(zhǎng)期不進(jìn)展者（LT－NP）。

到底TP與LTNP的這些差異能否找到遺傳學(xué)的證據(jù)？這是近幾年來(lái)國(guó)際上科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。國(guó)際上諸多研究證實(shí)，呈現(xiàn)基因多態(tài)性的人體免疫組織相關(guān)抗原——人白細(xì)胞抗原（HLA）對(duì)HIV/AIDS疾病的進(jìn)展有重要影響，但這些針對(duì)西方人群的基因效應(yīng)是否也能反映中國(guó)人群的基因多態(tài)性對(duì)HIV/AIDS疾病進(jìn)展的影響呢？

李太生教授等人選擇在北京協(xié)和醫(yī)院規(guī)律隨訪的43例中國(guó)成年艾滋病患者，根據(jù)其感染時(shí)間的長(zhǎng)短、感染后出現(xiàn)的癥狀及治療情況、CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)以及血漿病毒載量，將患者分為L(zhǎng)TNP和TP兩組。兩組研究對(duì)象的性別、年齡、傳播途徑等沒(méi)有差異。其中LTNP組15名，感染HIV至少已8年，CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)不少于500/立方毫米。TP組28名，其定義符合1993年美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心(CDC)艾滋病診斷標(biāo)準(zhǔn)。李教授的艾滋病實(shí)驗(yàn)室是迄今國(guó)內(nèi)惟一以這兩組典型群體作為研究對(duì)象開(kāi)展研究的艾滋病研究中心。

研究人員采集患者外周靜脈血，用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，用bDNA病毒定量檢測(cè)方法測(cè)定血漿病毒載量。結(jié)果顯示兩組間CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及血漿病毒載量差異顯著。隨后用序列特異性引物PCR技術(shù)（PCR-SSP）對(duì)HLA-B位點(diǎn)進(jìn)行基因分型，比較LTNP及TP兩組在HLA-B位點(diǎn)上是否存在差異。

HLA-B位點(diǎn)在基因水平上可以分為多個(gè)不同的等位基因，如HLA-B*57、HLA-B*27等等；而其血清型則更簡(jiǎn)單分為Bw6純合子、Bw4純合子和Bw4/Bw6雜合子三種。也就是說(shuō)HLA-B位點(diǎn)任何一種等位基因類(lèi)型的血清表達(dá)產(chǎn)物不除外上述三種血清型中的一種。

從HLA-B位點(diǎn)的等位基因來(lái)看，雖然國(guó)際上曾報(bào)道HLA-B*57、-B*27、-B*51這些等位基因?qū)Π滩』颊呒膊∵M(jìn)展有延緩作用，HLA-B*35等位基因?qū)膊∵M(jìn)展有促進(jìn)作用。但李太生教授的研究并未觀察到這些基因在中國(guó)人LTNP與TP兩組上有分布差異，李太生教授坦言，HLA-B*27、HLA-B*35等多態(tài)性位點(diǎn)，在不同種族間是不是一定有大的差異、對(duì)于中國(guó)的艾滋病患者的疾病進(jìn)展是不是一定沒(méi)有影響，目前尚不能完全定論，需要更大規(guī)模的研究以評(píng)估。然而他們的研究卻發(fā)現(xiàn)TP組HLA-B*15基因的頻率顯著高于文獻(xiàn)所報(bào)道的中國(guó)人群該等位基因的頻率，提示對(duì)中國(guó)人而言，HLA-B*15等位基因可能是一個(gè)影響疾病進(jìn)展的因素。

從HLA-B位點(diǎn)血清型看，研究者檢測(cè)到，TP組中HLA-B位點(diǎn)為Bw6純合子的患者比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于LTNP組。28名TP有12名為Bw6純合子，15名LTNP中僅1名為Bw6純合子，兩組差異顯著（P=0.013）；與此相反，15名LTNP中有3名的HLA-B位點(diǎn)為Bw4純合子，而28名TP中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)具有Bw4純合子的患者，兩組也達(dá)到顯著差異（P=0.037），后者與2001年國(guó)外的報(bào)道也是相符合的。

由于HLA-B*15等位基因的產(chǎn)物全部為Bw6血清型。那么導(dǎo)致LTNP及TP兩組患者遺傳學(xué)差異的“始作蛹者”到底是HLA-B*15等位基因，還是其產(chǎn)物Bw6純合子血清型？李太生教授等用多變量邏輯回歸對(duì)這兩個(gè)因素進(jìn)行綜合分析后發(fā)現(xiàn)，Bw6純合子對(duì)疾病進(jìn)展的促進(jìn)作用不受HLA-B*15等位基因的干擾。它作為一個(gè)獨(dú)立因素，與艾滋病患者疾病進(jìn)展的比值為7.048，顯著高于1.0，即攜帶Bw6/Bw6純合基因型的人感染艾滋病病毒后發(fā)病速度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于不攜帶Bw6/Bw6純合基因型的人；同時(shí)研究還驗(yàn)證了西方學(xué)者所發(fā)現(xiàn)的Bw4/Bw4基因型對(duì)疾病進(jìn)展可能有延緩作用。