上海市藥檢所與華東師大建立重組人胸腺肽α1高效表達(dá)平臺(tái)

據(jù)中國(guó)醫(yī)藥報(bào)上海訊 記者白毅報(bào)道 記者從上海市藥品檢驗(yàn)所獲悉，該所徐偉東博士和華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院吳自榮教授成功構(gòu)建了小肽高效表達(dá)平臺(tái)，得到了胸腺肽α1高效表達(dá)基因工程菌株；在此基礎(chǔ)上建立了小肽中試發(fā)酵工藝和純化工藝平臺(tái)，獲得一套完整的胸腺肽α1中試發(fā)酵工藝和純化工藝。該項(xiàng)研究——“重組人胸腺肽α1高效表達(dá)平臺(tái)的建立、中試工藝及其藥學(xué)研究”近日獲得上海市藥學(xué)會(huì)2005年上海藥學(xué)科技獎(jiǎng)三等獎(jiǎng)。

胸腺肽α1（Tα1）是由28個(gè)氨基酸組成的小肽，具有免疫增強(qiáng)活性，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的分化和成熟，促進(jìn)成熟T細(xì)胞、自然殺傷（NK）細(xì)胞分泌白介素（IL）-2、腫瘤壞死因子（INF）-α等。此外，胸腺肽α1還具有刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移、促進(jìn)血管生成和傷口愈合等作用，已用于乙型肝炎、丙型肝炎、惡性腫瘤以及免疫缺陷疾病等的臨床治療和研究中。但是，目前胸腺肽α1在國(guó)內(nèi)尚未能大規(guī)模生產(chǎn)，主要是由于化學(xué)合成胸腺肽α1的生產(chǎn)成本高、基因工程生產(chǎn)產(chǎn)量太低等原因。

為了提高胸腺肽α1的基因工程產(chǎn)量，降低生產(chǎn)成本，減少生產(chǎn)污染，徐偉東博士和吳自榮教授聯(lián)合進(jìn)行的研究利用同尾酶技術(shù)，以基因串聯(lián)的方式分別構(gòu)建了重組人胸腺肽α1多基因串聯(lián)融合表達(dá)載體、重組人胸腺肽α1多SD序列串聯(lián)融合表達(dá)載體和重組人胸腺肽α1多啟動(dòng)子串聯(lián)融合表達(dá)載體，得到了三種模式的高效融合表達(dá)重組人胸腺肽α1的系列工程菌，對(duì)比了各工程菌的優(yōu)缺點(diǎn)，篩選到高效表達(dá)菌株E.coliBLR(DE3)(pET32a-4Tα1)，并以此為研究對(duì)象，獲得了重組人胸腺肽α1工程菌在中試條件下的發(fā)酵工藝和純化工藝，使每升發(fā)酵液可獲得純度在95%以上的胸腺肽α149毫克，其生化特性和生物學(xué)活性完全符合藥物生產(chǎn)的要求，為新藥的臨床申報(bào)做好了準(zhǔn)備。

據(jù)悉，本研究中，“SD序列-目的基因”串聯(lián)的融合高效表達(dá)平臺(tái)、“T7啟動(dòng)子-SD-目的基因”串聯(lián)的融合高效表達(dá)平臺(tái)及做好把目標(biāo)肽和要去除的相關(guān)肽進(jìn)行純化標(biāo)簽的高效純化方式等研究在國(guó)內(nèi)外尚未見有關(guān)報(bào)道。