研究發(fā)現(xiàn)：蜂毒素可抑制肝癌細(xì)胞增殖

第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院中醫(yī)科近日在提取高純度蜂毒素的基礎(chǔ)上，開(kāi)展了蜂毒素抗腫瘤的療效及作用機(jī)制的研究，發(fā)現(xiàn)蜂毒素可抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖，并且減少增殖細(xì)胞中核抗原（PCNA）陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)，影響細(xì)胞周期的比率，為蜂毒素臨床應(yīng)用于抗腫瘤提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

蜂毒素是蜂毒的主要活性成分，約占蜂毒干重的50％。近年來(lái)，隨著蜂毒分離、提取、純化技術(shù)的不斷提高，對(duì)蜂毒素的功能及作用機(jī)制的研究也日益廣泛。有研究表明蜂毒素可以通過(guò)多種途徑影響細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并具有抗菌、抗病毒及抗腫瘤等廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。

研究人員采用臺(tái)盼藍(lán)染色法測(cè)定細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，四唑鹽比色試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞增殖的抑制率，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期和細(xì)胞PCNA的表達(dá)，觀察蜂毒素處理前后肝癌細(xì)胞SMMC7721變化情況。結(jié)果表明，蜂毒素可明顯抑制肝癌細(xì)胞SMMC7721的生長(zhǎng)、增殖，PCNA陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率隨著蜂毒素劑量的增加而降低，經(jīng)蜂毒素作用后的細(xì)胞周期表現(xiàn)為S期細(xì)胞增加，G2/M期細(xì)胞減少。

研究人員介紹，以往的研究顯示，大劑量蜂毒素在體外對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有極強(qiáng)的殺傷作用，而小劑量蜂毒素具有明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，4、16微克/毫升蜂毒素對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，并且4微克/毫升蜂毒素處理組經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色發(fā)現(xiàn)細(xì)胞壞死率不足1％，說(shuō)明此濃度的蜂毒素對(duì)SMMC7721生長(zhǎng)的抑制不是通過(guò)細(xì)胞毒作用，而有可能是通過(guò)細(xì)胞凋亡途徑。進(jìn)一步研究表明蜂毒素可以顯著降低PCNA的表達(dá)，并與濃度呈負(fù)相關(guān)。PCNA對(duì)細(xì)胞周期有重要的調(diào)控作用，其合成和表達(dá)與細(xì)胞的增殖狀態(tài)密切相關(guān)，蜂毒素對(duì)SMMC7721肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制有可能與PCNA的表達(dá)降低有關(guān)。

另外，鑒于腫瘤的特征之一是細(xì)胞周期異常，使腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖，因而腫瘤治療的中心環(huán)節(jié)就是干擾細(xì)胞周期，從而影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖或誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)流式細(xì)胞儀觀察了蜂毒素處理后細(xì)胞周期變化，發(fā)現(xiàn)4、16微克/毫升蜂毒素可影響SMMC7721細(xì)胞的細(xì)胞周期正常移行，阻止S期細(xì)胞進(jìn)入G2/M期，造成S期細(xì)胞聚集，G2/M期細(xì)胞減少。

研究人員指出，蜂毒來(lái)源豐富，作用廣泛，生物活性強(qiáng)，是醫(yī)藥和生物工程方面的重要原料。但蜂毒在腫瘤臨床應(yīng)用方面尚受到一些毒副作用的限制，隨著蜂毒素提純技術(shù)的進(jìn)步及對(duì)其結(jié)構(gòu)、劑型改造研究的深入，蜂毒在腫瘤的臨床治療方面的價(jià)值將會(huì)越來(lái)越大。