《中國(guó)生物制品規(guī)程》 附錄6　類(lèi)A血型物質(zhì)測(cè)定法（血凝抑制法）

1　試劑

1.1抗A血型血清

1.2A血型物質(zhì)：制備一標(biāo)準(zhǔn)溶液，含量1mg/ml，由中國(guó)藥品生物制品檢定所分發(fā)或經(jīng)其認(rèn)可。

1.31%A型紅細(xì)胞（懸于生理鹽水，6人份混合）。

2　方法

2.1抗A血型血清試驗(yàn)劑量的測(cè)定

準(zhǔn)備一組10支9mm直徑試管，將抗A血型血清用生理鹽水進(jìn)行2倍系列稀釋，體積為0.1ml，由1/2稀釋度開(kāi)始，加1%A型人紅細(xì)胞0.1ml。同時(shí)以0.1ml鹽水和0.1mlA型紅細(xì)胞作陰性對(duì)照。搖勻，室溫放置15分鐘，1500r/min離心1分鐘，按細(xì)胞沉降壓縮情況觀察凝集程度?？笰血型血清的最高稀釋度仍呈現(xiàn)4+完全凝集（在搖勻后，紅細(xì)胞沉降物必須保持不受觸動(dòng)）者含一個(gè)抗體試驗(yàn)劑量。

2.2制品中A血型物質(zhì)的滴度

準(zhǔn)備一組10支9mm直徑試管，將樣品用生理鹽水進(jìn)行2倍系列稀釋，體積為0.1ml，由原倍樣品開(kāi)始。

A血型物質(zhì)對(duì)照：準(zhǔn)備一組10支9mm直徑試管，將A血型物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液用生理鹽水進(jìn)行2倍系列稀釋，體積為0.1ml，由1/100稀釋度（0.01mg/ml）開(kāi)始。

于每稀釋度樣品及A血型物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液中加0.1ml含2個(gè)試驗(yàn)劑量抗A血型血清。搖勻，置37±0.5℃10分鐘，再于上述各管中加入1%A型人紅細(xì)胞，搖勻，37±0.5℃放置15分鐘，1500r/min離心1分鐘，按紅細(xì)胞沉降壓縮情況觀察凝集程度。

3　結(jié)果計(jì)算及判定限度

3.1計(jì)算

將樣品呈現(xiàn)完全血凝抑制（終點(diǎn)）的最高稀釋倍數(shù)乘以對(duì)照組呈現(xiàn)相似血凝抑制的最高倍稀釋管的血型物質(zhì)含量，即為每ml樣品所含類(lèi)A血型物質(zhì)的mg數(shù)。

3.2判定限度

制品中類(lèi)A血型物質(zhì)含量不得超過(guò)0.004mg/ml。