《中國生物制品規(guī)程》 半微量定氮法

1　試劑

1.1　硫酸

化學純，比重1.84。

1.2　消化劑

硫酸銅（CuSO4·5H2O）1份與硫酸鉀（K2SO4）10份共同研細混勻即成。

1.3　12.5mol/L氫氧化鈉液

取氫氧化鈉500g，加蒸餾水至1000ml，搖勻。

1.4　2%硼酸吸收液

硼酸20g加蒸餾水使溶解成1000ml，加混合指標劑10ml，搖勻。

1.5　混合指示劑

0.2%（g/ml）溴甲酚綠酒精溶液5份與0.1%（g/ml）甲基紅酒精溶液2份混合配成。

1.6　標準0.01mol/L鹽酸或0.005mol/L硫酸溶液。

2　操作

2.1　消化

準確量取一定體積樣品（含氮量在1～2mg左右）于凱氏定氮瓶中，加消化劑約0.3g，濃硫酸1.0ml進行消化，至澄明藍綠色，繼續(xù)消化約60分鐘，同時做空白。

2.2　蒸餾與滴定

取10ml硼酸吸收液于100ml三角瓶內(nèi)，將凱氏蒸餾器冷凝管末端浸入硼酸吸收液內(nèi)，將消化好的樣品移入凱氏蒸餾器內(nèi)，用蒸餾水洗定氮瓶3～4次，洗液亦移入蒸餾器內(nèi)，再加5ml　12.5mol/L氫氧化鈉溶液，然后進行蒸餾，待接收液總體積約35～50ml,將冷凝管末端取出液面，讓蒸汽沖洗約1分鐘，再用少量蒸餾水沖洗冷凝管末端，接收液用標準0.01mol/L鹽酸或0.005mol/L硫酸進行滴定，至溶液顯著變色。

3　計算

（樣品滴定數(shù)–　空白滴定數(shù)）×標準鹽酸mol/L×14

樣品總氮含量(mg/ml)────────────────────────

樣品ml數(shù)

附注

1.蒸餾前應(yīng)蒸洗蒸餾器15分鐘。

2.蒸汽發(fā)生瓶內(nèi)應(yīng)加數(shù)滴硫酸及甲基紅指示劑至呈明顯紅色。