《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)》 三、培育方法

培育近品系的重要手段，一是交配繁殖，二是人工選擇，兩者經(jīng)常是同時(shí)進(jìn)行的。交配繁殖的目的在于使存在于基代雙親（即用于培育近交系的最初一對(duì)小鼠）中的不同遺傳位點(diǎn)的不同基因通過連續(xù)許多代的重新組合達(dá)到純合的程度，并保持足夠數(shù)量的后裔可供交配時(shí)選擇。人工選擇的目的是挑選符合培養(yǎng)需要（有繁殖能力或其它的特殊性狀）和淘汰不需要的個(gè)體。

（一）近交的交配方式

開始培育近交系種群和引起的近交系原種的維持，一般采用以下三種方法：

1．單線法：從近交系原種選出3～5個(gè)兄妹對(duì)進(jìn)行兄妹交配，從中選出生產(chǎn)能力最好的一對(duì)進(jìn)行繁殖，然后從中選擇一對(duì)作為下一代生產(chǎn)的雙親，如此一代代的延續(xù)下去。這個(gè)方法生產(chǎn)的個(gè)體比較均一，但選擇的范圍太小，由于只有單線的仔代，易發(fā)生斷代危險(xiǎn)。

2．平行法：選3～5對(duì)兄妹對(duì)，每個(gè)兄妹對(duì)都選留下一代種鼠，一代代的延續(xù)下去，這個(gè)方法生產(chǎn)的個(gè)體不太均一，但選擇范圍大，易發(fā)生分化。

3．選優(yōu)法：這個(gè)方法保留了上述兩個(gè)方法的優(yōu)點(diǎn)克服了兩個(gè)方法中的缺點(diǎn)，是個(gè)較好的保種方法。假定每代選6對(duì)，每對(duì)都選自同一雙親的仔代同胞兄妹，在繁殖過程中，每一代均保持6對(duì)，當(dāng)某對(duì)出現(xiàn)不孕或生產(chǎn)能力降低，而不適于繼續(xù)繁殖時(shí)，則可從另一對(duì)所生的后代中選擇優(yōu)良者加以代替。近交系原種動(dòng)物的維持方法見圖3-2。

圖3-2近交系原種群（基礎(chǔ)群）的維持方法

（二）交配繁殖

1．近交系的培育要在專用固定的飼養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行。為了避免別的鼠系的進(jìn)入和防止可能發(fā)生的感染，應(yīng)有嚴(yán)密的隔離設(shè)備和措施。如墻壁門窗都不能有縫道，飼養(yǎng)罐蓋子要十分嚴(yán)密，不能讓任何小鼠隨便進(jìn)入。外觀相似種系不同的動(dòng)物應(yīng)分室飼養(yǎng)。工作人員進(jìn)入飼養(yǎng)室時(shí)需帶口罩，非飼養(yǎng)人員不能隨便進(jìn)入。飼養(yǎng)罐、飲器、食具等使用前都要滅菌消毒等。

2．應(yīng)該嚴(yán)格遵照單對(duì)配對(duì)，父母同罐的要求。這樣便于隨時(shí)檢查和發(fā)現(xiàn)問題。而且雄鼠不離開雌鼠可以減少搞錯(cuò)譜系的危險(xiǎn)，雄鼠也不干擾幼鼠的哺育和成長。一般不應(yīng)采取一雄二雌的交配飼養(yǎng)方式，因?yàn)閮蓚€(gè)雌鼠可能同時(shí)懷孕，有時(shí)難于辨認(rèn)年齡相仿的仔鼠與母鼠的關(guān)系。

3．對(duì)同系的每個(gè)鼠都應(yīng)有詳細(xì)明確的譜系和戶籍記錄：包括飼養(yǎng)罐號(hào)，同對(duì)的雌雄鼠號(hào)碼（可根據(jù)父母鼠號(hào)碼、胎數(shù)、同胎中第幾號(hào)等確定）、培育代數(shù)、生育日期、胎數(shù)、產(chǎn)雌雄仔鼠數(shù)、斷乳后存活的雌雄仔鼠數(shù)，選作傳代交配的仔鼠號(hào)等等。記錄不全或戶籍登記錯(cuò)誤往往會(huì)造成無法挽救的損失，特別是當(dāng)這個(gè)錯(cuò)誤未被及時(shí)發(fā)覺時(shí)。如果對(duì)一個(gè)動(dòng)物譜系身份有懷疑，應(yīng)立即予以丟棄。另外，所有飼養(yǎng)罐也要加貼有明確記錄的標(biāo)簽并隨時(shí)進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)任何情況都就立即記入戶籍記錄。

4．選用第一、二胎同胎仔鼠作b×s交配比b×o交配更易處理，而且常常繁殖的更好。如有必要也可用同父母不同胎的仔鼠配對(duì)。譬如在一胎仔鼠的性別完全或大部分相同的時(shí)候，經(jīng)過很多代的近交繁殖以后，有時(shí)也可以用親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的堂（表）兄妹進(jìn)行交配。當(dāng)然這時(shí)近交系數(shù)要退回到它們的共同祖先（對(duì)堂兄妹交配來說是退回到祖代）這一代的F值。但如這種做法只是為了想提高繁殖較差的生育率，那么倒不如停止這條線的繁殖，另找一個(gè)生育較高的亞系作為近交繁殖的新起點(diǎn)更為妥善，因?yàn)榍懊娴淖龇词鼓軌蚺嘤鲆粋€(gè)近交系來，它的后裔也往往難以提供足夠的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量。

5．在近交系培育過程中，為了保證對(duì)生育力有一定的選擇范圍（生育力的選擇常常需要挑選多產(chǎn)和斷乳后存活的仔鼠較多的亞系進(jìn)行交配繁殖），每一代都應(yīng)保留一定數(shù)目（3～4個(gè)）的亞系，以后隨著代數(shù)的增加，除留下最后2～3代分出的亞系外，其余可陸續(xù)淘汰或拋棄，直到最后留下一個(gè)可追溯到基代的品系。因此除了記錄下譜系和戶籍之外，常常還需要隨時(shí)繪制象下面的那些譜系圖，如圖3-3，以便分清或隨時(shí)終止某些亞系。

圖3-3　近交系培育過程中動(dòng)物的譜系圖

提供交配繁殖的亞系選擇應(yīng)特別注意：

（1）這個(gè)亞系應(yīng)具有培育所需要的性狀。

（2）至少與準(zhǔn)備終斷的亞系有差不多的生育率和生活力。在繁殖良好的種系中一般在第3～4代以后就可終斷其它的亞系而只留一個(gè)亞系。如果子裔不太多，至少需傳5～6代甚至10代以后才能這樣作。

6．在完成20代b×s交配繁殖而建成一個(gè)近交系之后，要繁殖足夠的動(dòng)物提供實(shí)驗(yàn)需要，同時(shí)又不放棄選擇最適合的動(dòng)物進(jìn)行繁殖并盡可能的保持遺傳的一致性，最好的作法是從近交系中取出幾對(duì)較好的動(dòng)物繼續(xù)照上面的辦法進(jìn)行b×s交配傳代，并保持譜系和戶籍記錄，同時(shí)把其余的動(dòng)物另室飼養(yǎng)，讓最后三代任意交配，加速繁殖?？梢悦抗薹?雄4雌，待受孕后取出母鼠，用它們的后代提供實(shí)驗(yàn)需要。開始時(shí)，應(yīng)注意多保留雌鼠。