中醫(yī)古籍
  • 《實驗動物科學》 七、近交系大、小鼠遺傳質(zhì)量檢測標準

    (一)管理制度

    1.引種來源清楚,應帶有譜系及特性資料(如近交代數(shù)、交配方式、遺傳組成、生物學特性),并應符合國際公認的遺傳概貌標準。

    2.按國際規(guī)定的近交系動物的繁殖系統(tǒng),進行種群維持和生產(chǎn)。

    (1)基礎群和血緣擴大群:

    應以同胞兄妹交配方法進行?;A群的維持一定按著近交系的保種方法進行,并應具有譜系及個體卡片記錄。

    (2)生產(chǎn)群:

    以隨機交配方法(或紅綠燈方法)進行生產(chǎn)??蛇B續(xù)繁殖3-5代,其生產(chǎn)群種鼠應與基礎群血緣關系保持相對平行。

    (二)遺傳質(zhì)量檢查

    1.方法的選擇:

    (1)異體皮膚移殖法:無論是大鼠,還是小鼠異體皮膚移植的方法,一直是鑒定近交品系的經(jīng)典方法,由于該方法既經(jīng)濟,又權威,為首選方法。

    (2)生化電泳方法:是近些年來利用同功酶和蛋白質(zhì)的多態(tài)性對近交系動物進行遺傳監(jiān)測的一種常規(guī)方法。由于其快速、準確、靈敏,在檢出亞系動物時,比起皮膚移殖法,有其獨特之處,可作為近交系小鼠遺傳質(zhì)量檢查的又一重要方法。

    2.位點的選擇:

    近交系動物遺傳品質(zhì)的變異,主要有三方面的因素:

    (1)遺傳污染;

    (2)遺傳漂變;

    (3)遺傳突變。

    在這三方面中遺傳污染危害最大,而另兩方面,在一定時間內(nèi)發(fā)生改變的頻率很低。因此,在位點選擇上,根據(jù)北京市現(xiàn)在常用的10種近交系小鼠,選擇了位于7個染色體上八個差異性位點,作為檢查的第一線位點。如果任何一種品系發(fā)生過遺傳污染,這八個位點中某些位點將會出現(xiàn)雜合或者變異??紤]到位點的選擇盡量分布在多個染色體上,我們又選擇了位于5個染色體上的五個比較容易操作,耗資較少的位點作為第二線位點的檢查。原則上,第一線位點的檢查如果發(fā)現(xiàn)了問題,將不再進行第二線位點的檢查。

    第一線位點:

    Hbb,Car-2,Gpd,ES-1,ES-3,Trf,Gp1,ldh-1。

    第二線位點:

    Mup,Pgm-1,ES-10,Sep-1,Ce-2。

    3.動物的選擇:

    近交系大、小鼠每個品系至少進行四只動物的異體皮膚移植。近交系小鼠皮膚移植成功者還需從核心群中選送四只動物(2♀,2♂年齡不限)進行生化位點的檢查。皮膚移植失敗者,則不考慮進行生化位點的檢查。

    4.結(jié)果的判斷:

    將檢測報告匯總,由專家小組作出結(jié)論。

    見附表五:差異性位點的選擇和10種近交系小鼠的遺傳概貌。

    表五

    Chromosome Locus/Strain734811971HbbCar-2GpdES-1ES-3TrfGpiLdh-1615SabbObaaTA1SbbaabaTa2dabbcbbaT739SbbbObaaBALA/CdbbbabaaC57BL/OSaaaabbaCBA/NdabbcabbC3H/HedbbbcbbaDBA/2dbbbcbabKKSaabcbba
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