Survivin是腦膠質(zhì)瘤基因治療的良好靶點(diǎn)

最近，由第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院全軍神經(jīng)外科研究所牽頭，該校基礎(chǔ)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心和唐都醫(yī)院全軍骨科中心參與完成的一項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目證明，Survivin基因可作為腦膠質(zhì)瘤基因治療的一個(gè)良好靶點(diǎn)。

Survivin是凋亡蛋白抑制因子（IAP）家族中的一個(gè)新成員，它在包括膠質(zhì)瘤在內(nèi)的人類多種類型的惡性腫瘤中存在高表達(dá)，而在成人的正常組織中無(wú)表達(dá)或僅有低表達(dá)，因此近年來(lái)成為頗受注目的腫瘤治療靶點(diǎn)之一。在前期工作中，研究人員采用RNA干擾（RNAi）技術(shù)，構(gòu)建了針對(duì)人Survivin基因的特異性短發(fā)卡RNA（shRNA）真核表達(dá)載體，并證實(shí)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染該表達(dá)載體可明顯抑制人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U251細(xì)胞Survivin基因mRNA和蛋白的表達(dá)，進(jìn)而顯著抑制U251細(xì)胞的體外生長(zhǎng)和誘導(dǎo)瘤細(xì)胞發(fā)生大量凋亡。

為觀察穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向Survivin基因的shRNA真核表達(dá)載體對(duì)人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U251細(xì)胞裸鼠體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)和血管形成的影響，研究人員將U251細(xì)胞（U251組），穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Survivin基因shRNA真核表達(dá)載體pWH1-SR的U251-SR細(xì)胞（U251-SR組），以及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染空載體pWH1的U251-P細(xì)胞（U251-P組），分別接種于裸鼠背部皮下，建立人腦膠質(zhì)瘤裸鼠皮下移植瘤模型，然后定期觀察腫瘤生長(zhǎng)情況，測(cè)定腫瘤體積，繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線，觀察45天后處死動(dòng)物，稱瘤重。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與U251組和U251-P組裸鼠相比，U251-SR組裸鼠腫瘤形成時(shí)間延遲，腫瘤生長(zhǎng)緩慢，腫瘤體積及瘤重均明顯減??；與U251組比較，U251-SR組腫瘤抑制率達(dá)85.6%；免疫組化染色顯示，U251-SR組腫瘤組織Survivin蛋白表達(dá)明顯下調(diào)，而U251組和U251-P組腫瘤組織Survivin蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異，均呈高表達(dá)。進(jìn)一步采用免疫組化方法檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）和八因子相關(guān)抗原（FⅧRAg）在移植瘤組織中的表達(dá)，計(jì)算各組腫瘤組織的增殖指數(shù)（PI）和微血管密度（MVD）后，研究人員又發(fā)現(xiàn)，與U251和U251-P組腫瘤相比，U251-SR組腫瘤PI和MVD明顯降低。采用TUNEL方法檢測(cè)凋亡細(xì)胞結(jié)果顯示，與U251組和U251-P組腫瘤相比，U251-SR組腫瘤凋亡指數(shù)（AI）顯著升高。

研究結(jié)果表明，靶向Survivin基因的shRNA能夠在體內(nèi)明顯抑制U251細(xì)胞的腫瘤生長(zhǎng)和血管形成，Survivin基因可作為腦膠質(zhì)瘤基因治療的良好靶點(diǎn)，而RNAi技術(shù)可為腦膠質(zhì)瘤的基因治療提供新的重要手段。