黃連小檗堿抗胃癌機(jī)制新闡述

日前，山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院通過(guò)觀察黃連的主要有效成分小檗堿對(duì)人胃癌細(xì)胞凋亡和相關(guān)調(diào)控基因表達(dá)水平的影響，發(fā)現(xiàn)小檗堿抗胃癌的機(jī)制主要為誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡，下調(diào)Bcl-2基因表達(dá)，上調(diào)野生型P53基因表達(dá)。

小檗堿是傳統(tǒng)中藥黃連的主要有效成分，具有抗炎、抗腫瘤、提高免疫力等功效。文獻(xiàn)報(bào)道稱小檗堿有抗腫瘤的作用，可誘導(dǎo)白血病HL-60細(xì)胞凋亡，但有關(guān)它抗胃癌、誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡的研究較少。

研究人員以人胃腺癌細(xì)胞株SGC-7901為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，用鹽酸小檗堿大(8微克/毫升)、小(4微克/毫升)兩個(gè)劑量進(jìn)行干預(yù)，采用光鏡、掃描電鏡、流式細(xì)胞儀對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行定性與定量檢測(cè)，采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)胃癌細(xì)胞中P53和Bcl-2的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果表明，小檗堿8微克/毫升作用72小時(shí)，電鏡下出現(xiàn)凋亡小體；4微克/毫升、8微克/毫升作用72小時(shí)，流式細(xì)胞儀DNA直方圖出現(xiàn)典型的亞二倍體峰；4微克/毫升作用72小時(shí)，Bcl-2基因表達(dá)水平降低，野生型P53基因表達(dá)水平升高；8微克/毫升作用72小時(shí)，Bcl-2基因不表達(dá)，野生型P53基因表達(dá)水平顯著升高。

研究人員介紹，P53基因與腫瘤關(guān)系密切，60％以上的人類(lèi)腫瘤細(xì)胞中存在P53基因的突變失活。P53基因的改變被認(rèn)為是人類(lèi)癌癥中最常見(jiàn)的基因變化?，F(xiàn)已在肝癌、成骨肉瘤、肺癌、結(jié)腸癌、神經(jīng)纖維肉瘤、腦瘤、乳腺癌及橫紋肌肉瘤等多種腫瘤中檢出了P53的突變和缺失。Bcl-2是一種新的致癌基因，它的高表達(dá)可引發(fā)腫瘤。

本研究通過(guò)掃描電鏡、流式細(xì)胞儀對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行定性與定量檢測(cè)，觀察到小檗堿可誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞SGC-7901凋亡。采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)胃癌細(xì)胞中抑制凋亡的Bcl-2基因和促進(jìn)凋亡的P53基因mRNA水平，發(fā)現(xiàn)小檗堿可抑制Bcl-2基因表達(dá)而促進(jìn)P53基因的表達(dá)，這可能是小檗堿抗癌的主要機(jī)理之一。