防治SARS中藥篩選過程全記錄（１）

作者王智民，防治SARS中藥篩選課題組成員。

中藥抗SARS篩選工作是在4月中旬開始準(zhǔn)備的，篩選方案幾經(jīng)修改，于4月底得到了國家"863"計(jì)劃的立項(xiàng)支持。入選進(jìn)入國家"863"計(jì)劃《治療SARS中藥篩選研究》的中藥品種是按照一定原則進(jìn)行選擇的。首先，鑒于當(dāng)時(shí)許多病理過程尚未知，篩選依照"三個(gè)做起"的指導(dǎo)原則進(jìn)行--"服務(wù)臨床，從SARS治療中已經(jīng)開始使用的藥物做起；解決急需，從已經(jīng)上市的中成藥物做起；結(jié)合實(shí)際，從臨床反映出的關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)做起"。根據(jù)當(dāng)時(shí)臨床上反映出的關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)--高熱、滲出、肺實(shí)變、急性呼吸窘迫癥、多臟器損傷等，選擇緩解癥狀、減輕病情、降低死亡率為突破口，進(jìn)行篩選方案的設(shè)計(jì)。我們從近萬種中成藥中進(jìn)行廣泛的遴選，利用中藥、化學(xué)、藥理、中醫(yī)臨床等的知識(shí)背景初步篩選出了針對(duì)不同發(fā)病時(shí)期癥狀和病理環(huán)節(jié)的100個(gè)中成藥，進(jìn)而對(duì)這100種中成藥查閱國內(nèi)外研究文獻(xiàn)，對(duì)文獻(xiàn)進(jìn)行分析綜合后，選擇出了65個(gè)，再結(jié)合廣東治療SARS的臨床用藥經(jīng)驗(yàn)，最后確定了首期進(jìn)入篩選計(jì)劃的30個(gè)中成藥的名單。篩選技術(shù)方案是經(jīng)過各方面專家的反復(fù)論證，采用與臨床病理環(huán)節(jié)相近的動(dòng)物模型進(jìn)行篩選的，并在"七個(gè)統(tǒng)一"的條件下開展篩選工作（"七個(gè)統(tǒng)一"即：統(tǒng)一頂層設(shè)計(jì)，統(tǒng)一目標(biāo)，統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，統(tǒng)一陽性藥，統(tǒng)一結(jié)果評(píng)定方法，統(tǒng)一供試藥物、劑量、配發(fā)與管理，統(tǒng)一信息發(fā)布的方法），為中醫(yī)藥參與SARS的臨床治療提供了科學(xué)數(shù)據(jù)。進(jìn)入篩選計(jì)劃的中藥品種有：清開靈注射液、魚腥草注射液、復(fù)方苦參注射液、板藍(lán)根顆粒、燈盞細(xì)辛注射液、新雪顆粒、香丹注射液、金蓮清熱顆粒、血塞通注射液、暑熱感冒沖劑、燈盞花素注射液、藿香正氣水、安宮牛黃丸、感冒清熱沖劑、生脈注射液、苦甘沖劑、川芎嗪注射液、諾迪康膠囊、羚翹解毒片、抗病毒口服液、醒腦靜注射液、清熱解毒口服液、參麥注射液、小兒清熱止咳口服液、抗感解毒片、雙黃連口服液、雙黃連粉針劑、丹參注射液、清瘟解毒片、外感風(fēng)痧顆粒、安腦丸。

全部篩選研究的結(jié)果將在科技期刊上陸續(xù)報(bào)道，其中名單的前19個(gè)藥物對(duì)不同的病理環(huán)節(jié)顯示出確切的療效。"全國防治非典指揮部"于5月22日發(fā)布了階段性研究成果，新聞發(fā)布時(shí)選擇了療效更好的前8個(gè)中藥品種進(jìn)行了發(fā)布。現(xiàn)將這8個(gè)發(fā)布品種的相關(guān)資料和信息與中醫(yī)藥同行分享，并給出相關(guān)的科技文獻(xiàn)，供大家參閱。

一、清開靈注射液

處方：板藍(lán)根、金銀花、梔子、水牛角、珍珠母、黃芩苷、膽酸、豬去氧膽酸。

清開靈作為解熱抗菌抗病毒藥物在臨床也已應(yīng)用多年，其療效是確實(shí)的。以《中國期刊網(wǎng)》為主要文獻(xiàn)檢索來源，對(duì)1994～2003年間在國內(nèi)核心期刊上發(fā)表的有關(guān)清開靈注射液論文進(jìn)行檢索，共檢索文獻(xiàn)330篇，其中有關(guān)臨床應(yīng)用的報(bào)道分析綜述如下。

1．文獻(xiàn)分布

2．療效分析

清開靈具有確切的解熱和抗病毒效果。在所報(bào)道的應(yīng)用于肺炎等呼吸道疾病中總有效率在80%～95%之間。此外，該藥還用于各種原因引起的腦功能障礙，如昏迷。這也是近年來臨床應(yīng)用的一個(gè)新的趨勢(shì)--此對(duì)于SARS中高熱伴有意識(shí)障礙的病例更為適用。如文獻(xiàn)中報(bào)導(dǎo)治療肺部感染所致昏迷的肺性腦病，有較好的療效。一般用藥后1～2天熱退，呼吸困難等癥狀、體征消失。臨床報(bào)道多數(shù)設(shè)有對(duì)照組，所使用的藥物為青霉素合病毒唑。

3．使用劑量及療程

規(guī)格：10ml/支，2ml/支。成人用量1～2ml/kg/d。小兒用量為10～50ml/次，3～7天/療程。一般建議劑量為成人每天不超過30ml。

4．體內(nèi)過程

以主要有效成分黃芩苷為指標(biāo)顯示，清開靈注射液?jiǎn)未谓o藥后家兔體內(nèi)t1/2α6.87±1.49分鐘，t1/2β308.1±87.4分鐘。MRT（平均注留時(shí)間）為96.4±27.3分鐘。

5．不良反應(yīng)

過敏性休克，藥物性皮炎，喉頭水腫，胃腸道反應(yīng)，血管神經(jīng)性水腫，急性左心衰。清開靈注射液劑量過大（30～40ml/次）易致外周血白細(xì)胞下降，一般在藥后2～3天出現(xiàn)。如用藥量在20～30ml/次之間，則無白細(xì)胞下降，同時(shí)療效不減。

6．配伍禁忌：

（1）配伍以300ml體積為宜，臨時(shí)配制，在2小時(shí)內(nèi)使用完畢。

（2）與頭孢唑啉鈉配伍有影響，與頭孢拉定、頭孢呋新、頭孢哌酮鈉、頭孢噻肟鈉配伍無明顯影響。

（3）與硫酸卡那霉素和維生素B6合用，產(chǎn)生混濁。與青霉素、鹽酸林可霉素、維生素C合用可使清開靈注射液中黃芩苷含量下降。

（4）禁止與硫酸妥布霉素配伍。

（5）與下列5種喹諾酮類藥物配伍出現(xiàn)混濁：

乳酸環(huán)丙沙星注射液（江西東亞藥業(yè)有限責(zé)任公司，2000011121）

氧氟沙星注射液（江西東亞藥業(yè)有限責(zé)任公司，2000010822）

洛美沙星注射液（安徽蚌埠新一制藥廠，000122.102）

氟羅沙星注射液（保定濟(jì)世生物藥業(yè)有限公司，990801）

培氟沙星注射液（白求恩醫(yī)科大學(xué)制藥廠，990439）

（6）小諾新霉素配伍禁忌。

（7）清開靈注射液2ml加入生理鹽水100ml，微粒明顯增加，建議使用帶終端濾器的一次性輸液器。

7．主要生產(chǎn)廠家及產(chǎn)品

北京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)藥廠，地壇牌清開靈注射液，10ml/支。

石家莊神威藥業(yè)股份有限公司，神威牌清開靈注射液，2ml/支。

山西太行制藥廠，太行牌清開靈注射液，10ml/支。

8．研究用樣品的生產(chǎn)廠家的確定

考慮到該產(chǎn)品具有一定的副反應(yīng)，因此，我們選擇時(shí)制定了（1）必須具有較好的GMP條件，能夠滿足臨床大量應(yīng)用的生產(chǎn)能力；（2）必須是大型企業(yè)；（3）有可供研究用的樣品這三條為選藥原則。因此我們選擇了石家莊神威藥業(yè)股份有限公司、北京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)藥廠作為研究用樣品。

9．篩選結(jié)論

清開靈注射液分別在流感病毒性肺炎、內(nèi)毒素吸入性肺炎、全氟異丁烯（PFIB）性肺損傷、2個(gè)肺細(xì)胞炎性損傷、內(nèi)毒素致熱、多臟器衰竭（DOMS）、急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）、急性肺纖維化模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果證明清開靈注射液均顯示出了較好的效果。

二、魚腥草注射液

1．處方：魚腥草，為鮮魚腥草經(jīng)加工制成的滅菌水溶液

2．研究用樣品的生產(chǎn)企業(yè)：福建三愛藥業(yè)股份有限公司

3．入選依據(jù)

魚腥草注射液具有清熱解毒、利濕的功能，主治肺膿瘍，痰熱咳嗽，白帶，尿路感染，癰癤。作為退熱、抗病毒藥物在臨床也已應(yīng)用多年，其療效是確實(shí)的。該藥物在廣東治療SARS的臨床已經(jīng)應(yīng)用，我們也以《中國期刊網(wǎng)》為主要文獻(xiàn)檢索來源，對(duì)1998～2002年間在國內(nèi)核心期刊上發(fā)表的有關(guān)魚腥草注射液論文進(jìn)行檢索，有關(guān)臨床應(yīng)用的報(bào)道見參考文獻(xiàn)。

主要有抗菌，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，抗過敏和平喘等作用。

體外抑菌實(shí)驗(yàn)表明，魚腥草素對(duì)卡他球菌、流感桿菌、肺炎球菌、金黃色葡萄球菌等均有明顯的抑制作用。對(duì)多種革蘭氏陽性及陰性細(xì)菌都具有明顯的抑制作用，以金黃色葡萄球菌及其耐青霉素株（最低抑菌濃度為62.5～80μg/ml）、肺炎雙球菌、甲型鏈球菌、流感桿菌（最低抑菌濃度為1.25μg/ml）為敏感；卡他球菌、傷寒桿菌等次之；而大腸桿菌、綠膿桿菌及痢疾桿菌不甚敏感；對(duì)白色念珠菌、新型隱球菌、孢子絲菌、曲菌、著色霉菌、紅色癬菌、疊瓦癬菌、石膏樣小孢子菌、鐵銹色小孢菌、鯊癬菌等也具有抑制作用。其最低抑菌濃度為2mg/ml。魚腥草的乙醚提取物對(duì)結(jié)核桿菌有明顯的抑制作用．在普拜二氏培養(yǎng)基中，其最低抑菌濃度為1：32000，在血清中的最低抑菌濃度為1：2000，對(duì)于尾靜脈感染結(jié)核桿菌H37RV株之動(dòng)物，能延長(zhǎng)生存時(shí)間、降低死亡率，但肺部病變僅有輕度減輕。魚腥草素在普拜氏液體培養(yǎng)基上對(duì)結(jié)核桿菌H37RV株的最低抑菌濃度為16μg/ml。魚腥草素及揮發(fā)油與甲氧芐氨嘧啶（TMP）配伍作用對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果表明，魚腥草素與TMP配伍有協(xié)同作用，抑菌作用顯著增強(qiáng)，魚腥草揮發(fā)油與TMP有拮抗作用，魚腥草揮發(fā)油能降低TMP的抑菌作用，但二者配伍能增強(qiáng)抗副傷寒及宋內(nèi)氏痢疾桿菌的作用。也有報(bào)道，魚腥草注射液在體外試驗(yàn)中，對(duì)大腸桿菌、短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、藤黃八疊球菌等均無抗菌作用，在體內(nèi)試驗(yàn)中，對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌感染的小鼠，均無保護(hù)作用。

4．不良反應(yīng)

臨床應(yīng)用肌注時(shí)，少數(shù)病人有局部疼痛；陰道內(nèi)給藥時(shí)，個(gè)別病例出現(xiàn)陰道充血。上述反應(yīng)在停藥后均消失。臨床應(yīng)用個(gè)別也有引起大皰性表皮松解萎縮型皮炎或藥疹、過敏性紫癜、過敏性休克乃至死亡。

5．篩選結(jié)論

魚腥草注射液分別在流感病毒性肺炎、內(nèi)毒素吸入性肺炎、2個(gè)肺細(xì)胞炎性損傷、內(nèi)毒素致熱和多臟器衰竭（DOMS）模型上進(jìn)行了驗(yàn)證，其對(duì)肺部各種炎性模型的效果較為滿意，但對(duì)多臟器衰竭模型未顯示出效果。

三、復(fù)方苦參注射液

1.處方：苦參、白土苓。

2.研究用樣品的生產(chǎn)企業(yè)：山西金晶藥業(yè)有限公司

3.入選依據(jù)

該注射液的主要化學(xué)成分為氧化苦參堿、苦參堿、槐果堿、苦參黃酮、土茯苓皂苷等。具有清熱利濕，涼血解毒，散結(jié)止痛的功能。針對(duì)復(fù)方苦參注射液共發(fā)表論文21篇。

巖舒注射液臨床報(bào)道胸膜腔內(nèi)注入巖舒注射液80ml治療10例癌性胸水，4周后復(fù)查胸片、B超觀察胸水情況，總有效率80%；還報(bào)道42例惡性腹水，在化學(xué)藥物無效的情況下，用巖舒注射液60ml腹腔注射治療，效果較好，總有效率在75%以上。用本品（含苦參等、山西金晶藥業(yè)生產(chǎn)）20ml、PDD40mg、IL-270萬單位，每周1次；對(duì)照組用PDD40mg、IL-220萬單位，每周1次。療效標(biāo)準(zhǔn)：完全緩解：胸水消滅至少維持1個(gè)月以上。部分緩解：胸水減少50%以上，維持1個(gè)月。穩(wěn)定：胸水減少不足50%。無效：胸水未減少或增加。結(jié)果：兩組分別完全緩解10、8例，部分緩解7、6例，穩(wěn)定1、3例，無效2、3例，總有效率85%、70%。結(jié)論：本品清熱利濕，殺蟲利尿，有良好的抗腫瘤作用。

注射液中所含氧化苦參堿、苦參堿的有關(guān)報(bào)道從1984～2003年共457篇。臨床報(bào)道具有胸腔內(nèi)注射治療惡性胸水、肺纖維化、肝炎、癌癥的作用。

氧化苦參堿、苦參堿等的抗炎作用與氫化考的松相似，能對(duì)抗巴豆油、角叉菜膠（大鼠）和冰醋酸（小鼠）誘發(fā)的滲出性炎癥。對(duì)大鼠由棉球誘發(fā)的慢性炎癥無效，其抗急性炎癥與垂體-腎上腺系統(tǒng)無關(guān)，管內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明是直接抑制炎癥反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)觀察到肌肉注射氧化苦參堿具有明顯延長(zhǎng)小鼠異體游離心肌存活期的作用，并具有量效關(guān)系。

對(duì)移植和非移植小鼠的脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和免疫球蛋白分泌細(xì)胞影響的研究結(jié)果顯示，移植術(shù)后10d小鼠體外脾臟細(xì)胞自發(fā)增殖增強(qiáng)，對(duì)刀豆蛋白A刺激的轉(zhuǎn)化反應(yīng)則明顯減弱。氧化苦參堿可顯著抑制正常小鼠的脾細(xì)胞的自發(fā)增殖及對(duì)刀豆蛋白A或脂多糖刺激的轉(zhuǎn)化反應(yīng)，而對(duì)手術(shù)已使之顯著降低的脾細(xì)胞對(duì)刀豆蛋白A刺激的轉(zhuǎn)化反應(yīng)無影響。這種選擇性抑制作用可能利于避免用其他常規(guī)非特異免疫抑制劑所帶來的危害。

以1％二硝基氯苯乙醇致敏豚鼠建立了實(shí)驗(yàn)性接觸性皮炎動(dòng)物模型，3天后，實(shí)驗(yàn)組肌注苦參素1/7LD50致死量，一周后觀察，實(shí)驗(yàn)組8只豚鼠中僅有一只皮膚有紅斑、充血及脫屑，空白對(duì)照組8只豚鼠7只皮膚有紅斑、充血及脫屑。兩組紅斑發(fā)生率有顯著差異（P＜0.05）。組織切片兩組動(dòng)物表層細(xì)胞內(nèi)水腫的細(xì)胞數(shù)差異有顯著性（P＜0.01），而炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度，兩組差異無顯著性。

注射液（40ml/次/日）具有非常明顯的消除癌癥腹水的作用，較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛，特別是閾前鎮(zhèn)痛的確切作用，抗炎、退熱作用，對(duì)于SARS治療中的肺實(shí)變，肺纖維化可能會(huì)具有較好的作用。

本品具有較好的安全性。急性毒性：小鼠靜脈注射LD50：12.14g/kg,腹腔注射LD50：27.8g/kg,肌肉注射最大耐受量為80g/kg,是臨床用量的300倍。大鼠的2個(gè)月長(zhǎng)期毒性研究表明：注射給藥大（21.2g/kg）、中（5.2g/kg）、?。?.6g/kg）三個(gè)劑量組的各個(gè)臟器（心，肝，脾、肺、腎、胃、十二指腸、腎上腺、睪丸、卵巢、輸卵管）均沒有出現(xiàn)任何異常，未見明顯的病變，與對(duì)照組相比，沒有顯著性差異。1個(gè)半月的犬長(zhǎng)毒，大（12g/kg），中（4.8g/kg）、?。?.6g/kg）靜脈給藥，結(jié)果：大、中劑量均出現(xiàn)了明顯的植物神經(jīng)系統(tǒng)的反應(yīng)，表現(xiàn)流涎癥狀，但此癥狀為一時(shí)性的，大劑量的流涎在30分鐘消失，中劑量在15分鐘消失，癥狀較輕；除了大劑量2只犬腎組織中出現(xiàn)輕度蛋白外，其它各組犬的病理檢查未見異常情況。

4．不良反應(yīng)：本品無明顯全身毒副反應(yīng)，局部使用有輕度刺激，但吸收良好。

5．篩選結(jié)論

復(fù)方苦參注射液在內(nèi)毒素吸入性肺炎、全氟異丁烯性肺損傷、2個(gè)肺細(xì)胞炎性損傷、多臟器衰竭模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果其對(duì)多臟器衰竭的效果較為突出，并顯示較好的抗纖維化作用，對(duì)全氟異丁烯性肺損傷未顯示出效果。