期待新突破——方劑配伍規(guī)律研究現(xiàn)狀與未來

方劑配伍規(guī)律是中醫(yī)藥理論的靈魂，也是目前制約中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。方劑配伍規(guī)律的現(xiàn)代研究經(jīng)歷從飲片到成分、從體外到體內(nèi)、從單一方法研究到多學(xué)科技術(shù)融合的歷程，在不同層面和不同角度上均取得了踏實的進(jìn)展，但仍存在許多問題，尤其是在方法學(xué)上有待于新的突破。

拆方研究

方劑是一個以中藥飲片經(jīng)配伍組成的治療系統(tǒng)，無論從化學(xué)還是從藥理學(xué)的角度來看都是一個復(fù)雜體系。拆方是目前應(yīng)用于方劑配伍規(guī)律研究最為常用的方法。近年來，已經(jīng)完成了桂枝湯、補中益氣湯、補陽還五湯、六味地黃湯及防己黃芪湯等大量經(jīng)典方劑的拆方研究，在尋找復(fù)方增效減毒作用的最佳組合、確定方中主要藥物或活性物質(zhì)、尋找方中藥物的最佳劑量配比關(guān)系、精簡方劑等方面取得了確定的成效。通過折方研究對許多中藥復(fù)方的配伍規(guī)律有了一定的認(rèn)識，也積累了一定的經(jīng)驗。但拆方研究方法尚存在一些不足，如拆方研究使原方劑被肢解、打破了方劑的整體性，甚至與原方劑相比已經(jīng)面目全非；數(shù)學(xué)設(shè)計的拆方分析與中醫(yī)理論相去較遠(yuǎn)；拆方研究的最終評價指標(biāo)未能與方劑所治疾病的病機緊密結(jié)合。因此，拆方研究所得結(jié)論不可能反映原方劑的本質(zhì)內(nèi)涵，更難以深入揭示復(fù)方配伍的普遍規(guī)律。

通過藥理效應(yīng)的變化研究

在復(fù)方藥理研究方面，主要是觀察了與藥理效應(yīng)變化之間的關(guān)系。已研究的方劑約60余個，其中早期的正柴胡飲、桂枝湯等名方的研究，堪稱這類研究的典范。之后，復(fù)方丹參方、血府逐瘀湯、補陽還五湯、參附湯、涼膈散、調(diào)胃承氣湯、枳實消痞丸等大量方劑也都采用這種研究方法。同期，國外主要是日本也進(jìn)行了大量的方劑藥效學(xué)研究，但多數(shù)都側(cè)重于利用現(xiàn)代技術(shù)揭示方劑作用機理及新功效探討，往往脫離中醫(yī)理論的指導(dǎo)，對方劑配伍研究較為薄弱。藥理效應(yīng)的研究方法，從藥效學(xué)角度對方中各藥（或藥組）的作用、地位及其相互關(guān)系進(jìn)行了探討，證明方劑中各藥味間具有協(xié)同或拮抗的相互作用；各組成藥物在方中具有君、臣、佐、使不同地位，在一定程度上驗證了方劑組成的合理性及中藥配伍應(yīng)用的優(yōu)越性，為方劑配伍研究提供了一定的藥理學(xué)實驗基礎(chǔ)。但是，該研究主要以某種藥效為指標(biāo)，不能從宏觀綜合調(diào)節(jié)水平進(jìn)行藥效分析，脫離了中醫(yī)“證”的概念，因此，難以客觀揭示方劑的組方原理；而且，對中藥化學(xué)成分的研究相對滯后，對方劑的物質(zhì)基礎(chǔ)與藥效之間的內(nèi)在關(guān)系認(rèn)識不清，難以從根本上闡明方劑配伍規(guī)律及其科學(xué)內(nèi)涵。

通過化學(xué)成分的變化研究

方劑配伍規(guī)律的研究，僅停留在中藥飲片配伍與藥效關(guān)系的層次上，顯然已經(jīng)很難再深入下去。因此，方劑研究勢必朝縱深方向發(fā)展，即朝向方劑中各有效成分間的內(nèi)在聯(lián)系的方向發(fā)展，從物質(zhì)基礎(chǔ)角度探討方劑的配伍規(guī)律。例如，中藥的沉淀性配伍研究發(fā)現(xiàn)以黃芩、黃連、黃柏為基礎(chǔ)的復(fù)方注射液存在嚴(yán)重的沉淀反應(yīng)。日本對仲景方12個含黃連的復(fù)方進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，黃連與甘草配伍后產(chǎn)生無苦味白色沉淀，提出研究沉淀物活性可能是有意義的。不同配伍葛根芩連湯中葛根素、黃芩苷、小檗堿的含量研究以及不同配伍麻黃湯中桂皮醛和苦杏仁苷含量的研究，證實配伍對有效成分的溶出率有影響。近年來，對方劑配伍后新成分的產(chǎn)生日益引起重視，生脈散全方的化學(xué)成分在煎煮后，產(chǎn)生了新成分5－羥甲基－2－糠醛（5－HMF），進(jìn)一步分析配伍作用發(fā)現(xiàn)，它是麥冬與五味子共煎過程中生成的，并與量的配伍有關(guān)；且生脈散全方及人參與麥冬、麥冬與五味子配伍中人參皂苷的含量也發(fā)生了變化。

方劑的化學(xué)成分是方劑發(fā)揮療效的根本，通過其研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大量的活性成分，為解析方劑的組成做出了巨大貢獻(xiàn)。但是，在方劑的制劑過程中，通常以水為溶媒，在100℃的情況下，產(chǎn)生新的活性物質(zhì)的可能性很小，偶有新成分出現(xiàn)，也多為絡(luò)合、沉淀等現(xiàn)象。而且，方劑的化學(xué)組成并不能代表其在體內(nèi)發(fā)揮生物效應(yīng)的化學(xué)形式。所以，僅從體外成分?jǐn)?shù)和量的變化角度來說明配伍藥物的

相互關(guān)系，很難闡明方劑的配伍規(guī)律。

體內(nèi)化學(xué)成分及藥代動力學(xué)研究

復(fù)方成分雖然復(fù)雜，但進(jìn)入體內(nèi)化學(xué)成分是有限的，體內(nèi)復(fù)方來源的化學(xué)成分，更能代表該方的整體藥效，其體內(nèi)動力學(xué)過程和藥效存在更緊密的相關(guān)性。而且，隨著檢測手段和檢測儀器的發(fā)展，使口服中藥后體內(nèi)成分的檢測成為可能。因此，方劑配伍規(guī)律的研究也就必然從體外轉(zhuǎn)入體內(nèi)。

日本學(xué)者首選利用現(xiàn)代分析技術(shù)對方劑進(jìn)入人體后的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行檢測。1989后，日本學(xué)者鹿野美弘分析了口服甘草附子湯后大鼠門靜脈血中成分。之后，相關(guān)研究也在國內(nèi)廣泛展開，如測定了健康人服川芎湯后阿魏酸的血藥濃度，四君子湯對脾虛大鼠胃動素影響，川芎嗪藥物動力學(xué)特征的影響，川芎赤芍配伍比例對芍藥苷藥代動力學(xué)的影響等。

這些研究為從物質(zhì)基礎(chǔ)角度闡明君、臣、佐、使的配伍原理及其科學(xué)內(nèi)涵、揭示組成藥物在方劑中的作用及地位奠定了技術(shù)基礎(chǔ)，使方劑配伍規(guī)律研究大為簡化，在中藥復(fù)方研究中發(fā)揮了巨大的作用。但是，沒有經(jīng)過藥效學(xué)檢驗的入血成分也可能是無效成分，方劑的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚有待進(jìn)一步闡明。所以，方劑的藥代動力學(xué)大多是在未確定有效成分的前提下，僅以個別成分的藥動學(xué)特征代表復(fù)方的藥動學(xué)規(guī)律，無法反映復(fù)方整體的藥動學(xué)特征；即使是體內(nèi)直接作用物質(zhì)的藥動學(xué)研究亦多數(shù)停留在闡明某一具體方劑的動力學(xué)參數(shù)水平，并不能用來解釋方劑的配伍變化規(guī)律。

中藥血清藥物化學(xué)研究

1997年，我國學(xué)者提出了“中藥血清藥物化學(xué)”的概念及理論。指出“中藥血清藥物化學(xué)”是“以藥物化學(xué)的研究手段和方法為基礎(chǔ)，多種現(xiàn)代技術(shù)綜合運用，分析鑒定中藥口服后血清中移行成分，研究其藥效相關(guān)性，確定中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)并研究其體內(nèi)過程的應(yīng)用學(xué)科”。

中藥血清藥物化學(xué)的方法，在全面分析復(fù)方人血成分、確定復(fù)方藥效物質(zhì)的基礎(chǔ)上，通過主要藥效成分的體內(nèi)動態(tài)、成分間相互作用及消長規(guī)律的研究，來科學(xué)地詮釋復(fù)方的配伍規(guī)律。經(jīng)過多年的實踐，該方法已經(jīng)成功地應(yīng)用于茵陳蒿湯、六味地黃丸、甘草附子湯等方劑配伍規(guī)律的研究。茵陳蒿湯主要藥效成分6，7－DME，配伍大黃后吸收速度加快，而消除速度減慢，配伍梔子后血中濃度出現(xiàn)兩次峰值，進(jìn)一步研究表明梔子中的成分促使6，7－DME產(chǎn)生了腸肝循環(huán)，從而使藥效增強。六味地黃丸給藥后血中出現(xiàn)了11個移行成分，其中1號峰成分來源于三種生藥：熟地中含有此成分直接被吸收人血，而山茱萸和澤瀉中雖不含有此成分，但給藥后血中也能產(chǎn)生該成分，使其吸收人血后的相對含量大大提高。復(fù)方中三種生藥對同一人血成分的產(chǎn)生有共同貢獻(xiàn)，表明了熟地配伍山茱萸和澤瀉的必要性。

必須強調(diào)的是，方劑配伍規(guī)律研究必須走出單一具體方劑研究的局限。因為單一方劑研究只是研究了一個處方，對配伍規(guī)律研究不夠全面，也不夠充分。而多種方劑之間差異過大，又必然出現(xiàn)不可控制的分散，不同方劑之間藥物組成缺少聯(lián)系，得出的結(jié)果就難以給出統(tǒng)一的處理和說明。而主方加上類方則是一個方劑系列，不同方劑之間在藥物組成上有機相聯(lián)，在主治病證方面同異相關(guān)，這才能顯示出方劑配伍的規(guī)律性。而以體內(nèi)直接作用物質(zhì)的質(zhì)與量變化為觀測指標(biāo)，才有可能對藥效作出最有力的說明，才是方劑作用的真正實質(zhì)。

總之，在上述思路的基礎(chǔ)上，未來的方劑配伍規(guī)律的研究應(yīng)該做到以下幾點：堅持“方證關(guān)聯(lián)、理法方藥統(tǒng)一”的整體研究思路；臨床療效確切，作用目標(biāo)明確（病、證具體）；能夠體現(xiàn)中藥復(fù)方君、臣、佐、使配伍規(guī)律；以構(gòu)方藥味的化學(xué)基礎(chǔ)研究相對清楚的方劑及其類方為模板；以病界定證的中心特征基礎(chǔ)上，實現(xiàn)有限目標(biāo)，把握基本病機，設(shè)計多層次、多靶點的系統(tǒng)性指標(biāo)，并制造相應(yīng)的動物模型，分析方劑配伍的生物效應(yīng)機制；充分利用中藥血清藥物化學(xué)的方法，揭示藥效物質(zhì)基礎(chǔ)變化與配伍、藥效學(xué)間的內(nèi)在聯(lián)系。在此基礎(chǔ)上，充分利用分子生物學(xué)等現(xiàn)代化科學(xué)技術(shù)，進(jìn)行藥效物質(zhì)比構(gòu)成與生物效應(yīng)靶點反應(yīng)特性的相關(guān)研究，揭示方劑配伍規(guī)律。從而建立一個研究復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機理、創(chuàng)制現(xiàn)代化高效中藥的方法學(xué)平臺。