《細(xì)胞和分子免疫學(xué)》 五、其它未歸類的粘附分子

除了上述四類粘附分子外，還有一些粘附分子目前尚未歸類，包括一組做為selectin分子配體的寡糖決定簇或載有這類寡糖決定簇的糖蛋白，如CD15、S-Lewisx、S-Lewisa;此外還有CD44、MAd、MLA等粘附分子。

（一）selectin分子結(jié)合的配體

1.CD15 CD15主要分布在粒細(xì)胞表面，是Lewis寡糖的異構(gòu)體。在第五屆白細(xì)胞分化抗原國際會(huì)議上，將唾液酸化的CD15命名為CD15s。S-Lewisx和S-Lewisa是唾液酸化的路易斯寡糖，兩者互為異構(gòu)體，S-Lewisx主要分布在白細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及某些腫瘤表面，S-Lewisa主要表達(dá)的某些腫瘤細(xì)胞。上述寡糖決定簇與多肽連接形成多種糖蛋白存在于某些細(xì)胞表面。

2.PNAd和CLA selectin分子的配體還包括有另外一些細(xì)胞表面的糖蛋白，包括PNAd和CLA。PNAd（peripheral lymphonode addressin)是表達(dá)在外周淋巴結(jié)高靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表面的一組糖蛋白，可與特異性抗L-selectin分子配體的單克隆抗體MECA-79發(fā)生反應(yīng)，分子量在50～200kDa之間，分子上載有唾液酸化的寡糖決定簇。CLA（cutaneous lymphocyte associated antigen)是表達(dá)在定向歸位于皮膚炎癥部位的記憶T細(xì)胞表面的一種糖蛋白，分子上存在類似S-Lewisx結(jié)構(gòu)的寡糖決定簇，可與血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的E-selectin分子相結(jié)合。唾液酸酶處理可以去除PNAd、CLA與selectin分子的結(jié)合活性。

（二）CD44

1.CD44分子的結(jié)構(gòu)和分布CD44是一種細(xì)胞表面糖蛋白，又稱Pgp-1、Ly-24、細(xì)胞外基質(zhì)受體Ⅲ（ECM-RⅢ）和Hermes。CD44分子的基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)可取用不同的外顯子使在mRNA水平上有不同的拼接方式，翻譯后糖基化的方式和程度也可以不同，導(dǎo)致成熟的CD44分子有多種變異體，按其分子量的不同可大致分為80～90kDa、110～160kDa和180～215kDa三類，每種變異體有其相應(yīng)的組織分布。僅由組成性外顯子編碼的氨基酸序列組成的CD44分子稱為標(biāo)準(zhǔn)CD44分子（CD44S），有314個(gè)氨基酸，其中胞膜外區(qū)248個(gè)氨基酸，跨膜區(qū)21個(gè)氨基酸，胞漿區(qū)72個(gè)氨基酸，核心蛋白分子量為37.2kDa，經(jīng)糖基化后為80～90kDa，與硫酸軟骨素結(jié)合后分子量可達(dá)180～200kDa。CD44分子胞膜外區(qū)靠近N端約100氨基酸范圍內(nèi)有6個(gè)Cys，組成三個(gè)二硫鍵，形成一個(gè)球形結(jié)構(gòu)，能被Hermes-1、KM-201單抗所識(shí)別，可能具有與透明質(zhì)酸結(jié)合的功能。胞膜外有6個(gè)N-連接糖基化位點(diǎn)和7個(gè)O連接糖基化位點(diǎn)，此外還有4個(gè)硫酸軟骨素連接位點(diǎn)。Hermes-3McAb識(shí)別CD44152～235間的84氨基酸肽段，此區(qū)域含有許多親水氨基酸，折疊后暴露于分子的外側(cè)，Hermes-3McAb能阻斷CD44（淋巴細(xì)胞）與粘膜HEV上的地址素結(jié)合。CD44分子上的硫酸軟骨素介導(dǎo)CD44與纖維連蛋白結(jié)合。CD44還可與細(xì)胞外基質(zhì)膠原蛋白Ⅰ和Ⅳ及層粘蛋白結(jié)合。

CD44分子分布十分廣泛，如T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞等。

圖2-8　CD44分子的結(jié)構(gòu)

注：●-　N-連接的糖基化位點(diǎn)

○-　○-連接的糖基化位點(diǎn)

*　硫酸軟骨素連接位點(diǎn)

2.CD44分子的變異體CD44多種變異體主要是由于CD44分子基因的不同拼接方式和翻譯后不同修飾所造成的。

（1）CD44分子基因的不同拼接方式：人CD44基因定位于11號(hào)染色體短臂上，CD44基因有20個(gè)高度保守的外顯子，每個(gè)外顯子的長度從70bp到210bp不等，被長短不一的內(nèi)含子所分隔。CD44基因的外顯子按表達(dá)方式不同可分為以下兩類：①10個(gè)組成型外顯子（C1～C10），轉(zhuǎn)錄片段存在于所有CD44轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中。僅由組成型外顯子編碼的氨基酸序列組成的CD44分子稱為標(biāo)準(zhǔn)CD44分子（CD44S）。體內(nèi)造血細(xì)胞（haemopoietic cell)主要表達(dá)糖基化的CD44S，稱為標(biāo)準(zhǔn)CD44H。②10個(gè)變異性拼接外顯子（V區(qū)外顯子，V1～V10），總長為1245bp。這10個(gè)V區(qū)外顯子介于第5和第6個(gè)組成型外顯子之間（圖2-9），其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物位于CD44S分子第222個(gè)密碼子的第一和第二個(gè)核苷酸之間。V區(qū)外顯子可以多種不同的方式進(jìn)行拼接。參加拼接的V區(qū)外顯子可多可少，從而產(chǎn)生了不同大小的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。人CD44基因中只有V2～V10外顯子，不含V1外顯子。含有V區(qū)外顯子編碼的氨基酸序列的CD44分子稱為CD44V，目前發(fā)現(xiàn)的CD44V有10余種，如CD44V（V2～V10）、CD（V8～V10）、CD44V（V4～V7）、CD44V（V6、V7）、CD44V（V6）等。

（2）CD44分子的翻譯后修飾：CD44分子是一種高度糖基化的蛋白，其翻譯后修飾包括N-糖基化、O-糖基化和硫酸軟骨素側(cè)鏈的連接。CD44分子中組成性外顯子和V區(qū)處顯子的編碼序列均含有糖基化位點(diǎn)和硫酸軟骨素側(cè)鏈的連接位點(diǎn)。CD44分子的胞膜外區(qū)N端部分有5個(gè)N-糖基化位點(diǎn)，另有一個(gè)N-糖基化位點(diǎn)位于近胞膜部位。CD44分子胞膜外區(qū)近胞膜部位富含絲氨酸和蘇氨酸，是O-連接糖基化位點(diǎn)，在此區(qū)域內(nèi)還存在有絲氨酸-甘氨酸二聚肽結(jié)構(gòu)，被認(rèn)為是硫酸軟骨素連接位點(diǎn)（圖2-8）。含V區(qū)外顯子編碼序列的CD44分子經(jīng)糖基化后分子量可達(dá)110～160kDa，而CD44分子與硫酸軟骨素分子的連接可使其分子量達(dá)180～215kDa。

圖2-9　CD44分子的基因結(jié)構(gòu)

3.CD44分子的主要功能CD44是細(xì)胞表面的粘附分子，主要參與細(xì)胞-細(xì)胞，細(xì)胞-基質(zhì)之間的粘附。

（1）CD44分子的配體為細(xì)胞外基質(zhì)，主要有透明質(zhì)酸、層粘連蛋白、纖粘連蛋白和膠原蛋白等多種配體，不同的CD44分子識(shí)別的配體有所差別。如85kDa的CD44分子可結(jié)合透明質(zhì)酸分子的硫酸軟骨素側(cè)鏈可與纖粘連蛋白羧基末端的肝素結(jié)合區(qū)結(jié)合。因此連接有硫酸軟骨素側(cè)鏈的CD44分子可以結(jié)合纖粘連蛋白。

（2）CD44分子作為淋巴細(xì)胞“歸巢”受體（lymphocyte homing receptor)與高內(nèi)皮靜脈（HEV）結(jié)合，參與淋巴細(xì)胞歸位到淋巴組織。

（30）參與T細(xì)胞的活化，抗CD44抗體可促進(jìn)T細(xì)胞對抗CD2和CD3抗體的應(yīng)答，某些抗CD44抗體可提高CD2/LFA-3依賴的T細(xì)胞與單核細(xì)胞的粘附作用。

（4）與細(xì)胞骨架蛋白結(jié)合，參與細(xì)胞偽足形成和遷移運(yùn)動(dòng)。CD44分子胞漿區(qū)絲氨酸和蘇氨酸磷酸化后，與細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的錨蛋白（ankyrin)結(jié)合的親和力增加，通過錨蛋白與細(xì)胞骨架發(fā)生連接。

粘膜型地址素（Med）和外周淋巴結(jié)型地址素（PNAd）將在本章第三節(jié)中加以介紹。