《實驗動物科學》 五、幾種簡便常用的微循環(huán)障礙動物模型復制方法

（一）高分子右旋糖酐（HMWD）法

選擇2～3公斤的健康家兔，雌雄不限。復制模型當天禁食、禁水。實驗前觀察眼球結(jié)膜微循環(huán)，采用微血管光滑、血流正常的動物，于清醒狀態(tài)下復制模型。HMWD是一種多聚化合物，它能在紅細胞間形成較多的穩(wěn)定的間橋，表面橋力大于原來的電荷排斥力，從而造成紅細胞聚集；加之其本身又是一種高粘度物質(zhì)，還可增加血粘度。將平均分子量為20～40萬的HMWD配成10%生理鹽水溶液，以7～15ml/kg體重的劑量給家兔作耳緣靜脈快速推注，如在用藥同時作動物球結(jié)膜微循環(huán)活體觀察，則可見到球結(jié)膜微循環(huán)中出現(xiàn)逐漸加強的血流緩慢，血細胞聚集，最后出現(xiàn)流動中的血細胞團塊。用藥前家兔眼球結(jié)微膜血管中的微動脈和毛細血管呈樹枝狀分布，微靜脈常與微動脈平行，血管由粗到細，光滑均交，微血流呈帶狀或線狀，偶可見到流動很快的粒線狀血流，但不會有血細胞聚集的顆粒狀血流出現(xiàn)。微動脈因血流較快呈線帶狀，常常不易看清其中的血細胞流動；毛細血管，特別是近瞳孔處的毛細血管網(wǎng)的血流常呈粒線狀流動。正常時微血管周圍無出血及滲出，因此微血管背景較白（鞏膜），視野清晰。用藥后，眼球結(jié)膜微循環(huán)中可見下列典型的急性微循環(huán)障礙表現(xiàn)：①毛細胞血管和微靜脈中紅細胞流速明顯減慢，因此血流呈斷線狀、虛線狀或粒狀，局部區(qū)域甚至完全停滯；②微血管中出現(xiàn)明顯的血細胞聚集，嚴重時見流動中的血細胞團塊；③有時尚可見到微血管發(fā)生輕度痙攣，微血管周圍有滲出和出血以及微靜脈中有血細胞貼壁翻滾的現(xiàn)象。用藥后24小時內(nèi)，上述急性微循環(huán)障礙表現(xiàn)最嚴重，少數(shù)動物可因急性栓塞而突然死亡，也有少數(shù)動物出現(xiàn)偏癱癥狀。存活者，如經(jīng)仔細護理，則72小時后HMWD破壞、排泄，微循環(huán)障礙逐漸好轉(zhuǎn)。經(jīng)測定，在此種急性微循環(huán)障礙模型中，動物血粘度明顯升高，紅細胞電泳變慢，血沉加速。

這種急性微循環(huán)障礙動物模型的復制方法簡便，出現(xiàn)快，成功率高（95%以上），適于探索與急性微循環(huán)障礙有關(guān)的各種疾病的發(fā)病機制及藥物作用原理的研究。

（二）胎兒羊水靜脈注射法

給家兔以1～4ml/kg體重的劑量靜脈注射新鮮的胎兒羊水，可復制成急性微循環(huán)障礙動物模型。對注射動物進行活體微循環(huán)觀察時發(fā)現(xiàn)，注射完畢時，即有血細胞流動速度減慢，毛細血管中可常見到微血流的間歇性流動，呈紅白交替現(xiàn)象，在微靜脈或較大的毛細血管中還?？梢姷诫S血流流動的透明細胞（可能為羊水細胞），20分鐘后，微血流明顯淤滯，局部出現(xiàn)凝血，微循環(huán)和較大的毛細血管中出現(xiàn)體積逐漸加大的白色團塊，這可能是流動中的白色血栓（以羊水細胞為核心構(gòu)成血栓）。注后1小時左右，大部分微血管停止流動，僅有部分微血管中可見血流緩慢移動，而且?？沙霈F(xiàn)栓塞所致的突然死亡。這種急性微循環(huán)障礙動物模型的復制成功率，常隨羊水的質(zhì)量而異。

（三）兔腦粉浸出液靜脈注射法

取新鮮兔腦粉100mg，加生理鹽水5ml，50℃溫箱孵育20分鐘，取上清液備用。給家兔耳緣靜脈推注上述溶液，劑量為1～4ml/kg體重，同時可給1/4m　CaCL24ml，必要時還可添加少量乳酸靜脈注射。

球結(jié)膜微循環(huán)觀察所見與HMWD復制的模型類似。此法最大的缺點是劑量不易控制，每個動物對兔腦粉浸出液（代替凝血酶）的敏感程度不一，用量太小，急性微循環(huán)障礙表現(xiàn)不顯；劑量稍大，動物可發(fā)生突然死亡，必須十分注意。