中醫(yī)古籍
  • 中藥葛根及其近緣種的rDNA-ITS序列分析

    葛根為常用中藥,來源于豆科葛屬植物野葛[Pueraialobata(Willd.)Ohwi]和粉葛(P.thomsoniiBenth.)的干燥根,葛屬(PuerariaDC.)植物全世界約有35種,我國已記錄11種。野葛和粉葛的形態(tài)極為相近,但由于他們有效成分含量相差顯著,而導(dǎo)致臨床上的功用有差異;它們與同屬的山葛[P.montana(Lour.)Merr.]在分種界限及親緣關(guān)系上一直存在爭議,而山葛則不能作為葛根入藥。轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS區(qū))序列進化速度較快,其速度恰與近緣種進化較一致,因此被廣泛用于高等植物近緣種的鑒別。

    北京軍區(qū)總醫(yī)院藥理科通過對rDNA-ITS序列差異分析,探討中藥葛根及其近緣種的分類地位及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系,為葛根的指紋圖譜鑒別提供分子標記。

    方法:測定并分析葛屬3種植物的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)序列及5.8SrRNA基因序列。結(jié)果:測得該屬3種植物的片段包括ITS1,5.8S和ITS2全長序列以及18S,26S部分序列。野葛與粉葛的ITS1,ITS2的差異性分別在2.10%和2.09%以內(nèi),而山葛與野葛、粉葛在ITS1,ITS2的差異性則分別達到8.14%和12.82%以上。根據(jù)ITS序列特征構(gòu)建的系統(tǒng)樹,不同產(chǎn)地的野葛首先聚類,然后與粉葛聚在一起,山葛最后聚類。

    結(jié)論:根據(jù)分子性狀特征,粉葛作為野葛的變種,山葛獨立成種較為合理。ITS序列特征是中藥葛根鑒別的有效分子標記。

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