PTFE血管材料可攜載VEGF基因轉(zhuǎn)染

近日，浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院普外科陶思豐博士等研究首次證實，聚四氟乙烯（PTFE）血管材料攜載的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）基因，可轉(zhuǎn)染種植在其表面的內(nèi)皮細胞，并能促進內(nèi)皮細胞生長。

研究據(jù)介紹，隨著基因治療血管性疾病研究的深入，人們開始應(yīng)用基因來改造人工血管。但選擇什么樣的基因進行轉(zhuǎn)染，如何使攜載基因能促進內(nèi)皮細胞的生長，已成為該領(lǐng)域研究的熱點。

為突破這一研究瓶頸，陶思豐等研究人員采用體外實驗研究的方法，選用PTFE為血管材料載體，將pC鄄DI-hVEGF121質(zhì)粒溶液注入PTFE人工血管，使其質(zhì)粒進入人工血管壁的孔隙中。接著，將從人臍靜脈中分離培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞，種植到攜帶VEGF基因質(zhì)粒的PTFE材料表面，經(jīng)6、24、72和120小時時間點的傳代培養(yǎng)后，用ELISA法對照檢測種植的內(nèi)皮細胞增殖和VEGF蛋白的表達情況。

檢測結(jié)果顯示：在24、72和120小時各時間點內(nèi)，VEGF質(zhì)粒組中內(nèi)皮細胞的黏附率明顯高于空白對照組（P<0.05）。同時，隨著培養(yǎng)時間的延長，VEGF基因不斷轉(zhuǎn)染內(nèi)皮細胞并表達VEGF。在120小時時間點內(nèi)，內(nèi)皮細胞增殖速率是空白對照組的4.6倍，其VEGF蛋白水平濃度為539.3皮克/毫升，空白對照組為10.8皮克/毫升，兩組相比，有顯著性差異（P<0.01）。提示PTFE攜帶的VEGF基因已成功轉(zhuǎn)染入內(nèi)皮細胞，并實現(xiàn)了VEGF蛋白的表達和內(nèi)皮細胞的快速增殖。

研究人員認為，VEGF是誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞生長作用最強、特異性最高的一種生長因子，而PTFE作為良好的人工血管材料載體，自身具有多孔特性，可使VEGF基因質(zhì)粒穩(wěn)定進入其管壁孔隙中黏附和釋放，其機制可能是：PTFE材料與內(nèi)皮細胞緊密接觸，為質(zhì)粒轉(zhuǎn)染內(nèi)皮細胞提供了空間；纖維連接蛋白和基因質(zhì)粒的混合，提高了質(zhì)粒與組織細胞的相容性，通過黏附分子受體與纖維蛋白作用后的內(nèi)吞效應(yīng)，介導(dǎo)了基因質(zhì)粒的協(xié)同入胞。本研究表明，PTFE血管材料可攜載VEGF基因質(zhì)粒，并能轉(zhuǎn)染種植在VEGF表面的內(nèi)皮細胞，促進其快速生長。這一結(jié)果，為PTFE人工血管材料的廣泛應(yīng)用開辟了新前景。