《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)》 四、近交系動(dòng)物在免疫研究中的應(yīng)用

（一）自身免疫性疾病

自身免疫性疾病主要的發(fā)病機(jī)理是免疫復(fù)合物造成的損害，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等，已知抗體起作用的疾病有重癥肌無力、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥等，此外還有一些目前不清楚的免疫病，即對(duì)其抗原和抗體的免疫反應(yīng)性都不清楚，這些病研究起來比較困難。由于免疫復(fù)合物病有較好的動(dòng)物模型，研究起來就方便多了。

1．研究感染與自身免疫病的關(guān)系。

純系新西蘭黑色小鼠（New　Zealand、Black,NZB）在出生后4-6個(gè)月大多數(shù)發(fā)生自身免疫性溶血性貧血。免疫學(xué)檢查表明，其紅細(xì)胞表面有自身抗體，血清中有抗核機(jī)體，病鼠的淋巴結(jié)、胸腺、脾臟及胰腺內(nèi)可以查到C型致瘤RNA病毒（此病毒還能引起白血?。?。將含有此病毒的組織輸給（NZB×BALB/c）F1時(shí)，能引起抗核抗體的生成和腎小球腎炎。據(jù)推測(cè)，當(dāng)宿主細(xì)胞受到病毒感染后，釋放出DNA，刺激免疫系統(tǒng)生成抗DNA自身抗體，此抗體與游離的DNA結(jié)合，形成免疫復(fù)合物沉積在腎小球基底膜上，引起腎小球腎炎，因此認(rèn)為本病是由于這種病毒感染所觸及的。此外，還發(fā)現(xiàn)約有50%的病鼠有抗自身T淋巴細(xì)胞的抗體，且其出現(xiàn)頻率隨鼠齡增加而升高，這種自身抗體能與正常鼠及病鼠的T細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，引起T細(xì)胞（包括抑制性T細(xì)胞）減少或功能衰退，結(jié)果，B淋巴細(xì)胞乃生成大量多種自身抗體。人的系統(tǒng)性紅斑狼瘡與NZB小鼠的這種自身免疫病十分相似，也能在淋巴樣組織中查到C型RNA病毒顆粒，其T淋巴細(xì)胞也能釋出病毒顆粒，也能查到抗自身T淋巴細(xì)胞的抗體（約占一半病例）而且病理變化也基本上與NZB小鼠的這種自身免疫病相同。

除了NZB小鼠的自身免疫性溶血性貧血以外，阿留申貂腦病（一種腦的退行性變性?。?、小鼠的淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎、羊的瘙癢病（skrapie）、馬的傳染性貧血也都是由于慢性病毒感染引起的自身免疫病。人的Kuru病與羊的瘙癢病、阿留申貂腦病相似，Kurn病只見于新幾內(nèi)亞的高爾族人，尤其是女人，她們有吃人肉的風(fēng)習(xí)，自從禁止了這種風(fēng)習(xí)以后，此病的發(fā)病率明顯地下降了。

2．研究自身免疫性疾病與遺傳的關(guān)系

進(jìn)行動(dòng)物自發(fā)的自身免疫病的遺傳學(xué)分析對(duì)于了解遺傳因素在人類自身免疫病中的作用很有幫助。如（NZB×NZW）F1小鼠由于MHC決定的抑制性T細(xì)胞功能喪失或減退，能自發(fā)地發(fā)生與人的系統(tǒng)性紅斑狼瘡十分相似的自身免疫病，因此，一般認(rèn)為它是人類自身免疫病的最佳天然模型。用系內(nèi)同代互交和回交法可以推斷：最低限度有三對(duì)等位基因控制免疫系統(tǒng)對(duì)自身抗原的反應(yīng)；控制抗紅細(xì)胞抗體生成的基因可能不同于控制抗核抗體生成的基因。這種推斷也在一種萊克享有純系雞的自身免疫性甲狀腺炎的遺傳學(xué)分析中得到了證實(shí)。這種雞的自身免疫性甲狀腺炎的發(fā)病受Ir基因控制，它們?nèi)狈刂菩訲細(xì)胞的功能。所以，B淋巴細(xì)胞能生成大量抗甲狀腺自身抗體，通常這種雞在孵出后二周即可查出抗甲狀腺抗體，幾個(gè)月后出現(xiàn)嗜睡、羽毛生長障礙，最后出現(xiàn)肥胖癥及甲狀腺機(jī)能低下的癥狀。如果在剛孵出時(shí)切除腔上囊，則可使這種甲狀腺炎的發(fā)病率減低，或使其病情減輕，抗甲狀腺抗體的效價(jià)下降。

3．研究胸腺功能低下與自身免疫病的關(guān)系

將新生小鼠摘除胸腺，造成T淋巴細(xì)胞缺乏的狀態(tài)，可見小鼠逐漸地發(fā)生消耗?。╓asting　Discase），其主要表現(xiàn)是體重下降，腹瀉、反復(fù)發(fā)生感染。有些小鼠發(fā)生了與人的SLE相似的自身免疫性溶血性貧血、皮疹、肝炎及腎小球腎炎。但是，如果把去胸腺小鼠放在無菌環(huán)境中飼養(yǎng)，就不發(fā)生上述自身免疫性疾病。這說明對(duì)于自身免疫性疾病的發(fā)生來說，胸腺機(jī)能低落是重要的內(nèi)在因素，而微生物的感染等則是重要的外界因素。又如，給新生的NZB小鼠摘除胸腺后，該小鼠的自發(fā)性自身免疫病加速發(fā)展，并迅速地出現(xiàn)溶血性貧血，血清中出現(xiàn)抗體DNA抗體、抗DNA組蛋白抗體、LE細(xì)胞及免疫復(fù)合物性腎小球腎炎。但是，如果把幼小無病的NZB小鼠的淋巴細(xì)胞輸給這些小鼠，則可防止自身免疫病的發(fā)生，反之，如果病鼠的脾細(xì)胞（含T淋巴細(xì)胞在內(nèi)）輸給幼小無病的NZB小鼠，則小鼠將迅速持續(xù)地合成自身抗體。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：胸腺功能衰退引起抑制性T淋巴細(xì)胞缺乏，與自身免疫病的發(fā)生之間有著密切的關(guān)系。與此相似，給剛剛孵出的萊克享肥雞摘除胸腺時(shí)也能加重其日后出現(xiàn)的甲狀腺功能低下?，F(xiàn)在知道：胸腺功能正常是T淋巴細(xì)胞的正常分化、成熟所不可缺少的。如果胸腺功能減退，則胸腺激素的產(chǎn)生必然減少（事實(shí)上，SLE病人及NZB病鼠血中的胸腺激素水平是低的），故T淋巴細(xì)胞，包括抑制性T淋巴細(xì)胞的分化、成熟將發(fā)生障礙（停滯），結(jié)果，對(duì)自身抗原有反應(yīng)能力的B淋巴細(xì)胞將不受遏制地產(chǎn)生大量自身抗體。

4．研究紅斑狼瘡疾病

對(duì)人的系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systgmic、Lupus　Erythematous,SLE），長期以來一直使用有自發(fā)類似狼瘡性腎炎疾病的B/WF1（NZB×NZWF1）小鼠作動(dòng)物模型，研究病因和治療方法，取得了很多資料。最近美國杰克遜實(shí)驗(yàn)室的Murphy醫(yī)生，建立培育了有自發(fā)性紅斑狼瘡的MRL/MP/lprl(MRL/L)小鼠和BXSB小鼠（只有雄性鼠發(fā)生早期狼瘡腎炎），用這些小鼠研究，得到了新的見解，重新評(píng)價(jià)了狼瘡腎炎的發(fā)病機(jī)制。

現(xiàn)在至少有十幾個(gè)品系的小鼠可以自發(fā)產(chǎn)生與SLE類似的自身免疫病，文獻(xiàn)中報(bào)導(dǎo)的主要有四個(gè)品系，它們有各自不同的表現(xiàn)（見10-5、6）。表10-5中四種小鼠都是到一定年齡時(shí)發(fā)生SEL，表現(xiàn)為抗體上升，免疫復(fù)合物增多，腎炎，而后逐漸死亡，可是它們還有不同的發(fā)病特點(diǎn)，例如NZB小鼠主要還有較多的抗紅細(xì)胞抗體，而MRL/L基本沒有；MRL/L有類風(fēng)濕因子、關(guān)節(jié)炎、淋巴組織增生，其它小鼠沒有等。所以NZB可作為免疫性溶血性貧血的最好模型，MRL/L是研究類風(fēng)濕的模型，NZB/W可以作為SLE的最好模型。此外值得注意的是胸腺對(duì)發(fā)病的影響也不同。幼小時(shí)切除胸腺，NZB/W的病有增加，說明切除胸腺后T細(xì)胞的抑制性降低，B細(xì)胞亢進(jìn)，MRL/L去胸腺后不得病。

表10-5　四種SLE品系小鼠的表現(xiàn)

指標(biāo)MRL/LBXSBNZBNZB/W去　胸　腺抗病-加重加重抗自身紅細(xì)胞+++　+　+++類風(fēng)濕因子+關(guān)　節(jié)　炎+淋巴組織增生卅++++T、B細(xì)胞T↑B↑B、T↑BT、↓

表10-6　四種SLE品系小鼠自身混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果

小　鼠　品　系年齡（月）轉(zhuǎn)化細(xì)胞滲入3H-TdR(Pm×10-3)自　發(fā)PHA刺激后C57BL／622.511.7CBA21.713.6NZB／W75.22.9MRL／L34.43.0

表10－6中四種小鼠的自身淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)反應(yīng)性也不一樣，說明它們的細(xì)胞本身有病變，不單有抑制性T細(xì)胞異常。

幾種SLE品系小鼠的主要免疫學(xué)特性：

⑴NZB系：

來自N20第三代中的一對(duì)黑鼠。H-2d，淋巴細(xì)胞表面同種抗原（Thy-1.2,Ly-1.2,Ly2.2,Ly3.2,Qa-1a,Mlsa,Tlau）,

①有自身免疫性溶血性貧血癥：在4-5月齡以前Ht　值平均為44%，以后伴隨增齡而下降，14月齡為32%，母鼠在6月齡后，公鼠在8月齡后出現(xiàn)Coombs氏試驗(yàn)陽性，伴隨增齡陽性化率增高，10月齡為50%，12月齡以后達(dá)100%。自6月齡起出現(xiàn)抗核抗體。老齡小鼠出現(xiàn)紅斑狼瘡細(xì)胞。

②有高血清免疫球蛋白病：血清免疫球蛋白量異常之高，特別是IgM和IgG量遞增。IgM量在一生中遞增，其遞增與性別、病情及Coombs氏試驗(yàn)都無關(guān)，并不因無菌飼養(yǎng)或初生期摘除胸腺而減少。血清中有抗2-和3-硝基酚抗體，且效價(jià)高。

③有類狼瘡性腎炎：8月齡以后的小鼠自發(fā)與人的狼瘡腎炎相似的以腎小病變?yōu)橹鞯哪I病變，并感染C型病毒。腎病變的為免疫復(fù)合物沉著所致。

④有特殊的胸腺病理組織學(xué)變化：伴隨增齡胸腺重要較其它近交系小鼠為早期減小，髓質(zhì)中形成淋巴濾泡，上皮細(xì)胞增殖，皮質(zhì)中漿細(xì)胞和肥大細(xì)胞浸潤。該現(xiàn)象與2～3周齡后出現(xiàn)的抗胸腺細(xì)胞自家抗體有關(guān)。

⑵NZW系

H-22，淋巴細(xì)胞表面同種抗原（Thy-1,2）。NZW與NZB雜交仔一代動(dòng)物B/WF1（NZB×NZWF1），有自發(fā)的類似狼瘡性腎炎、紅斑狼瘡細(xì)胞（LE細(xì)胞）陽性和抗核抗體陽性。

⑶BXSB系

來自C57BL/6J×SB/leF1，H-2b,淋巴細(xì)胞表面同種抗原（Thy-1,2、TL-、Ly-1,2、Ly-2,1,Ly-3,1、Qa-1b），抗自身紅細(xì)胞陽性，淋巴組織增生，B淋巴細(xì)胞增多。

⑷MRL/1系

MRL/1小鼠是由C57BL/6J（H-2b）、C3H/Di(H-2k)、AKR/J(H-2k)及LG/J(H-2b)四個(gè)品系反復(fù)雜交育成的白化小鼠。從交配的過程推斷，基因組成是LG75%，AKR12.6%,C3H12.1%,C57BL/60.3%。同種抗原和表現(xiàn)型是H-2k,Lyt-1.2+,　Lyt-2.1+,Lyt-3.1+,Lyt-1.2+,TL-。IgG2a的同種異型為a。其它免疫學(xué)特性有：

①有全身性淋巴結(jié)顯著腫脹：3月齡時(shí)腫脹明顯可見，交隨日齡增長而增大。

②有腎炎及血管炎、多呈急性或亞急性腎炎和多發(fā)性血管炎。4-5月齡時(shí)，用熒光標(biāo)記可見抗IgG和C3抗體。在腎小球的腎毛細(xì)血管壁和腎小球膜上，能明顯檢出免疫復(fù)合物。血管內(nèi)皮細(xì)胞和腎小球膜增殖，基底膜肥厚，有蛋白樣物質(zhì)沉著，類似人的狼瘡腎炎。

③有類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎：類似人的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，20-25%的MRL/1小鼠有關(guān)節(jié)軟骨破壞，滑膜增厚，形成血管翳，滲出液貯留等類似人的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的病狀。

④有高免疫蛋白及補(bǔ)體減少：血液中免疫球蛋白量常呈高值、5月齡時(shí)達(dá)MRL/n小鼠的5倍，4～5月齡鼠的IgG達(dá)26mg/dl，約為正常小鼠的6-7倍。分類測(cè)定的結(jié)果是：IgA、IgM、IgG2b為正常小鼠的2倍，IgG1、IgG2a為6倍。血液中補(bǔ)體效價(jià)隨月齡增長而下降。

⑤有半抗原抗體及自身抗體等。2-3月的MRL/1小鼠，在血清中檢出抗2-硝基酚和抗3-硝基酚抗體。抗單鏈DNA抗體也在2-3月齡時(shí)被檢出并隨日齡而升?？闺p鏈DNA抗體、抗Sm抗體；抗核糖核苷蛋白（RNP）抗體，抗ATP抗體等各種抗核成分的抗體效價(jià)也上升。

⑥有免疫復(fù)合物。血液中的免疫復(fù)合物可用多種方法檢測(cè)到，MRL/1小鼠比其它狼瘡小鼠的檢出效價(jià)都高。免疫復(fù)合物與狼瘡腎炎和血管炎都有直接關(guān)系。

⑦有淋巴細(xì)胞異常變化：MRL/L小鼠脾臟和淋巴結(jié)內(nèi)Thy-1陽性的T淋巴細(xì)胞異常地增殖，4月齡以上小鼠的脾臟有70-90%，淋巴結(jié)有95%以上是Thy-2陽性細(xì)胞。自身免疫病小鼠的T細(xì)胞對(duì)刀豆素A的反應(yīng)下降，而且用刀豆素A誘導(dǎo)，產(chǎn)生白細(xì)胞間介素Ⅱ的能力也下降。自發(fā)性狼瘡腎炎小鼠的抗半抗原抗體，抗單鏈DNA抗體及產(chǎn)生免疫球蛋白的細(xì)胞增多特征為在初期是IgM型，而4月齡時(shí)則以IgG型為主，產(chǎn)生免疫球蛋白的細(xì)胞增多與腎炎的發(fā)展的有密切關(guān)系。

⑧免疫反應(yīng)下降：對(duì)綿羊紅細(xì)胞的一次及二次抗體反應(yīng)答反應(yīng)隨月齡增長而顯著下降。在2月齡時(shí)可查出對(duì)DNP－－卵蛋白元的一次和二次IgG及IgE的應(yīng)答反應(yīng)，而到4月齡時(shí)就查不出的這些抗體了。

（5）MRL/n系

MRL品系小鼠在近交12代時(shí)發(fā)生常染色體隱性突變成兩個(gè)亞系，其一具有l(wèi)pr(lyromephoproliferative,淋巴增生)基因稱MRL/1亞系，另一個(gè)則無此突變稱MRL/n亞系。MRL/1小鼠因第5染色體上有l(wèi)pr基因，2月齡時(shí)除發(fā)生全身性淋巴腫瘤外，并出現(xiàn)早期狼瘡性腎炎，5-6月齡時(shí)半數(shù)死亡。疾病的發(fā)展比B/WF1小鼠快，所以使用價(jià)值也大。而MRL/n小鼠缺乏lpr基因，僅遲發(fā)輕度腎炎。Lpr基因?yàn)槌Ｈ旧w的劣性基因。把這基因?qū)肫渌∈?，也能出現(xiàn)MRL/1小鼠的各種癥狀。

5．研究自身免疫病時(shí)的免疫病理特點(diǎn)

⑴多種自身免疫反應(yīng)及其它免疫反應(yīng)特點(diǎn)

共有的血清學(xué)特點(diǎn)為：高丙球蛋白血癥、抗核抗體、抗dsDNA、抗SS-DNA、抗決定基抗體、高水平gp70、免疫復(fù)合物與補(bǔ)體水平降低（NZb　C5缺乏）。

不同的特點(diǎn)為：出現(xiàn)抗Sm為MRL/n、MRL/1鼠系；出現(xiàn)IgG和IgMRA和關(guān)節(jié)炎的為MRL/1鼠系；出現(xiàn)抗紅細(xì)胞抗體者為NZB、NZBXW鼠系；出現(xiàn)NTA者為NZB、NZBXW、BXSB鼠系，T細(xì)胞升高者為MRL/1鼠系，B細(xì)胞升高者為BXSB鼠系♀，B細(xì)胞及T細(xì)胞下降者為NZB鼠系♂、NZ鼠系。

⑵免疫復(fù)合物的致病作用

在小鼠SLE中，gp70-抗gp70的免疫復(fù)合物（IC）在伴隨SLE的腎炎中起重要作用。在這類小鼠中15-30%具有急性或陳舊性心肌梗死或退化性血管病，此乃由于IC沉積于心肌血管所致。唯獨(dú)MRL/1部分小鼠可發(fā)展為急性或壞死性關(guān)節(jié)性，甚至所出現(xiàn)的各種病變與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎十分類似。

⑶多株B細(xì)胞的高反應(yīng)性

用三種方法測(cè)定出B細(xì)胞功能增高的現(xiàn)象；

①測(cè)定Ig分泌細(xì)胞及細(xì)胞（脾）質(zhì)內(nèi)Ig含量（免疫熒光法）細(xì)胞數(shù)量皆增高；②所有SLE鼠系脾臟抗三硝基苯（TNP）空斑形成細(xì)胞（PFC）皆含有較高水平的抗TNP結(jié)合SRBC的抗體；③鼠脾臟B細(xì)胞集落數(shù)目增多，B細(xì)胞的活躍尚表現(xiàn)于高丙球蛋白血癥中；表現(xiàn)出對(duì)T-依賴性抗原去凝聚BGG及HGG的免疫耐受有抵抗力。更值得注意的是，MRI/1及雄性BXSB小鼠較正常MRL/n及雌性BXSB小鼠對(duì)免疫耐受性無抵抗力，容易誘導(dǎo)成功。有關(guān)全身B細(xì)胞活性增高和過度產(chǎn)生自身抗體的準(zhǔn)確機(jī)制尚不清楚，但推測(cè)有可能是由于內(nèi)源性或外源性B細(xì)胞激活、缺乏抑制T細(xì)胞負(fù)作用、增強(qiáng)輔助T細(xì)胞正反應(yīng)、T調(diào)節(jié)細(xì)胞的亞類缺乏或缺乏免疫系統(tǒng)的其它成分如巨噬細(xì)胞等所致。但是，目前大多數(shù)認(rèn)為B細(xì)胞的活性增高是與全身性T細(xì)胞的調(diào)節(jié)缺陷無關(guān)。

6．研究T及B細(xì)胞在自身免疫病的作用

通過實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型研究證實(shí)自身耐受特別是T、B細(xì)胞的耐受（即對(duì)某一特定抗原無反應(yīng)性）是引起自身免疫病發(fā)生的中心問題，雖然抑制細(xì)胞有時(shí)與耐受狀態(tài)有關(guān)，但并非是誘導(dǎo)和保持耐受的原因。成年動(dòng)物亦常會(huì)由應(yīng)用無免疫原性抗原（可溶性或稱去凝聚的蛋白質(zhì)）引起耐受。誘發(fā)T、B細(xì)胞的耐受原的量具有很大不同，T細(xì)胞的耐受原量要比B細(xì)胞少得多，如小量抗原引起T細(xì)胞耐受時(shí)，B細(xì)胞仍舊活躍，并未誘導(dǎo)出耐受。例如在體內(nèi)細(xì)胞外存在的低濃度自身抗原如甲狀腺球蛋白、某些種類Ig或生長激素，皆可使T細(xì)胞產(chǎn)生耐受，而B細(xì)胞則不產(chǎn)生耐受，體內(nèi)高濃度的血清白蛋白則可同時(shí)引起T、B細(xì)胞耐受。但是尚有一些存在于體內(nèi)的很低濃度的抗原如堿性蛋白、細(xì)胞色素C、獨(dú)特型決定簇等對(duì)T、B細(xì)胞皆不能引起耐受?？傊甌、B細(xì)胞的耐受程度是依賴于其微環(huán)境中自身抗原的濃度。

根據(jù)T、B細(xì)胞對(duì)自身抗原的免疫狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)性自身免疫疾病有以下結(jié)論：（1）實(shí)驗(yàn)性自身免疫甲狀腺炎、EAT：T細(xì)胞耐受，B細(xì)胞激活；（2）實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)腦炎：直接激活活性T細(xì)胞；（3）實(shí)驗(yàn)性自身免疫重癥肌無力、EAMG；T及B細(xì)胞皆激活；（4）類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎：單克隆B細(xì)胞激活。

（二）高免疫球蛋白血癥

免疫球蛋白的變化對(duì)分析免疫反應(yīng)極為重要，各種免疫蛋白（Ig）都具有一定的結(jié)構(gòu)、特點(diǎn)及較穩(wěn)定的數(shù)值，它是了解Ig各種免疫功能及免疫反應(yīng)作用機(jī)制的物質(zhì)基礎(chǔ)。

人類和哺乳動(dòng)物的血清中含有成千上萬種免疫球蛋白，每一種免疫球蛋白分子的氨基酸排列順序都不一樣。按其理化、生物學(xué)及免疫特性可分為免疫球蛋白G、A、M、D、E五種。而IgG又可分為四個(gè)亞型，IgA分為三個(gè)亞型，IgM分為兩個(gè)亞型。

小鼠免疫球蛋白中已知有IgM、IgA、IgE、IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3，其中IgE和IgG3正常小鼠血清中含量甚少。小鼠各類Ig的數(shù)量因品系不同而差異很大，因此了解用于實(shí)驗(yàn)的小鼠Ig的情況很重要?，F(xiàn)將幾個(gè)常用小鼠品系的各類Ig情況介紹如下：

1．IgM:在3月齡以前BALB/C、C3H/He、C57BL/6三品無差異，為200μg/ml左右。BALB/C在三個(gè)月以后也無多大變動(dòng)。但C57BL/6隨增齡而增加，生長一年雌性和雄性都超過500μg/ml，C3H/He伴隨增齡也有一定程度增加，但其程度不如C57BL/6。此外，N2B呈高值，并出現(xiàn)IgM的巨球蛋白血癥，CBA/N呈低值，出現(xiàn)IgG缺乏癥。

2．IgA：BALB/C一月齡已呈高值，為C3H的2倍，C57BL/6的10倍。BALB/C、C3H/He和C57BL/6都隨增齡而增加，尤以BALB/C為著，BALB/C在6月齡后，超過1000μg/ml的個(gè)體很多，8月齡全部超過1000μg/ml。皮下移植106IgA的漿細(xì)胞瘤細(xì)胞20天后，IgA量為2～3mg/ml左右，正常BALB/C超過1000μg/ml的個(gè)體可視為免疫球蛋白過多癥。正常BALB/C最高值時(shí)（20月齡）也僅為200～300μg/ml，與BALB/C相比呈低值，C57BL/6伴隨增齡緩慢增加，平均值不超過1000μg/ml。與雄性相比，BALB/C的雌性呈高值，其它品系無一定傾向。BALB/C的IgA呈高值，與BALB/C小鼠腹腔內(nèi)注射礦物油后所生漿細(xì)胞瘤的60%為IgA合成株的現(xiàn)象有關(guān)。

3．IgG1：C3H/He在3月齡以后下低，但BALB/C在3月齡以后仍然增加，和IgA相同，6個(gè)月齡以后幾乎全部超過1000μg/ml。C3H/He在20月齡時(shí)為200μg/ml，降低到3月齡時(shí)1/5左右。C57BL/6為低值，但伴隨增齡而緩慢增加。在IgG的亞型中，IgG1呈高值的品系有DBA/2，SJL和NZB。

SJL伴隨網(wǎng)狀細(xì)胞瘤而產(chǎn)生的單克隆性M成份，大部分為IgG，其中IgG1最多。在DBA/2×CBA雜交子一代，即使自然發(fā)生的漿細(xì)胞性白血病也幾乎都是IgG,IgG1仍為最多。據(jù)報(bào)導(dǎo)IgG1難建立免疫耐受性，在SJL、BALB/C、NZB等品系難以建立免疫耐受性。

4．IgG2a：C3H/He6月齡以前呈高值。BALB/C在8月齡時(shí)呈短暫高值，在其它時(shí)期，看不到象IgA和IgG1那樣與其它品系小鼠的顯著差別。C57BL/6與C3H/He相比為低值，但隨增齡而緩慢增加。

5．IgG2b：BALB/C在8月齡時(shí)有一定增加，但在其它時(shí)間里幾乎沒有變動(dòng)，為100～300μg/ml，在IgG的亞型中為最低值，C3H/He也看不出隨齡而引起的變動(dòng)。C57BL/6伴隨增齡而增加，在IgG的亞種中為最高值，在12月齡以上的個(gè)體中有超過1000μg/mg者。

從上可知小鼠Ig含量多少因品系不同而差異很大。BALB/C的IgM和IgG2b為低值，IgG1和IgA為高值。然而C57BL/6則相反，IgG1為低值，IgG2b和IgM為高值。C3H/He的IgA為低值，IgG2a為高值。NZBIgM呈高值，出現(xiàn)IgM的巨球蛋白血癥，CBAIgM呈低值，出現(xiàn)IgM缺乏癥。

（三）各種免疫缺陷病和過敏癥

1．補(bǔ)體（C′5）功能缺乏癥：C5缺乏可使血清的調(diào)理作用失調(diào)，導(dǎo)致中性多核白細(xì)胞的趨化、吞噬及殺菌作用的無能，容易反復(fù)感染病菌。AKR/N和BIO、DZ/DSnN品系小鼠補(bǔ)體5缺損，易發(fā)生先天性補(bǔ)體C5功能缺乏癥。DBA/2N品系小鼠補(bǔ)體C5活性低，相反BALB/CAnN品系小鼠的補(bǔ)體C5活性高。

2．遲發(fā)型超敏反應(yīng)：遲發(fā)型超敏反應(yīng)中包括結(jié)核菌素超敏反應(yīng)，Jones-Mote型皮內(nèi)過敏反應(yīng)和接觸性過敏癥等。不同近交系小鼠的反應(yīng)性有很大差異，如用純蛋白衍生物（PPD）作抗原時(shí)，其足墊反應(yīng)明顯的近交系有：ICR，BALB/C，C57BL/6，DBA/2，C3H/He；反應(yīng)稍弱的近交系為CFW，CDF1；反應(yīng)弱的近交系為NZB，C57L，CBA；HR/Jms是反應(yīng)最弱的近交系。如用綿羊紅細(xì)胞（SRBC）作抗原時(shí)，不同近交系小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)也有較大差異，SWM/Ms、ddN、DDy是高反應(yīng)的近交系；ICR、DDD、BALB/C（♀）為較高反應(yīng)的近交系；C57BL/6J，C3H/He、DBA/2（♂）是低反應(yīng)的近交系。

第五屆國際免疫學(xué)會(huì)議重點(diǎn)研究討論了速發(fā)型超敏感性的機(jī)理和調(diào)節(jié)。Sehon介紹了他的實(shí)驗(yàn)室用B6D2F1系小鼠做的工作。將變應(yīng)原如卵青蛋白等與單丁氧聚乙二醇（mPEG）共價(jià)偶聯(lián)后可抑制IgE的生成而不影響其他類抗體的水平。關(guān)于mPEG結(jié)合物用于治療IgE介導(dǎo)的過敏性疾病的實(shí)用價(jià)值，已有作者在豕草和蜂毒過敏的病人中做過一些嘗試，初步結(jié)果是令人鼓舞的。Sehon認(rèn)為mPEG結(jié)合物不僅可用于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病的治療，而且可用于許多需注射異種蛋白質(zhì)的疾病；如器官移植時(shí)為防止排斥作用而注射鼠或大鼠抗T細(xì)胞的單克隆抗體等。

K.Ishizaka介紹了他們實(shí)驗(yàn)室過去5年研究IgE應(yīng)答的類特異性調(diào)節(jié)作用，在感覺巴西日?qǐng)@線蟲的大鼠以及最近建立的能分泌IgE結(jié)合因子的大鼠－小鼠T細(xì)胞雜交瘤所作的工作。發(fā)現(xiàn)與IgE有親和力的IgE-結(jié)合因子（IgE-BF）能選擇性地調(diào)節(jié)IgE應(yīng)答。他們將正常大鼠的腸系膜淋巴結(jié)細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)加入不同濃度的Cona　(1r或10r/ml)，經(jīng)2-3天后取出此活化的細(xì)胞再加入IgE繼續(xù)培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)兩種濃度的ConA均能誘導(dǎo)產(chǎn)生IgE-BF，但I(xiàn)gE-BF的性質(zhì)不同。低劑量Cona　所誘導(dǎo)產(chǎn)生的大部為IgE-抑制因子（IgE-SF），高劑量ConA誘導(dǎo)產(chǎn)生的大部為IgE-增強(qiáng)因子（IgE-PF）。前者不能與扁豆外源凝集素結(jié)合，能選擇性地抑制IgE應(yīng)答；后者能與扁豆外源凝集素結(jié)合并能增強(qiáng)IgE應(yīng)答，其分子上有含甘露糖的低聚糖。作者進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)原來每ml加入10r的Cona　IgE-PF，但在第二個(gè)階段孵育時(shí)加入能抑制糖基化作用的蛋白質(zhì)（Tunicamycin）后卻改而產(chǎn)生IgE-SF。還證明福氏完全佐劑能促進(jìn)產(chǎn)生IgE-SF，明磯能促進(jìn)產(chǎn)生IgE-PF。這是由于前者能誘導(dǎo)產(chǎn)生糖基化作用抑制因子，而后者誘導(dǎo)產(chǎn)生糖基化作用促進(jìn)因子。已知糖基化作用抑制因子系分子量為16000的多肽，可生成IgE-BF來調(diào)節(jié)IgE應(yīng)答。Ishizaka希望對(duì)此課題的基礎(chǔ)研究能開辟一條調(diào)節(jié)過敏病人IgE應(yīng)答的新途徑。

Katz過去證明在小鼠中有變態(tài)反應(yīng)抑制因子（SFA）可抑制小鼠IgE的應(yīng)答。在此次討論中它以大量的實(shí)驗(yàn)證據(jù)證實(shí)了人SFA的存在。SFA能選擇性地抑制IgE抗體合成。人SFA來自雙向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（MLR）的上清液。測(cè)定系統(tǒng)是培養(yǎng)的人單個(gè)核細(xì)胞，于其中加入適量的PWM，在PWM刺激前一天加入MLR上清顯著地抑制了淋巴細(xì)胞體外IgE的產(chǎn)生。Katz建立了一個(gè)敏感的放射免疫測(cè)定法，敏感度高達(dá)10pgIgE/ml。他的實(shí)驗(yàn)室已得到能產(chǎn)生大量人SFA的T細(xì)胞雜交瘤系，為研究人SFA的性質(zhì)提供了方便，籍此采用遺傳工程的方法將相應(yīng)的轉(zhuǎn)移到大腸桿菌，而生產(chǎn)大量的人SFA。

Kishimoto在已成功地建立了具有鼠IgE類特異性抑制功能的T細(xì)胞雜交瘤的基礎(chǔ)上又建立了一些能分泌免疫調(diào)節(jié)因子的T細(xì)胞雜交瘤，并應(yīng)用這個(gè)方法來克隆人IgE類特異性抑制性T細(xì)胞，初步結(jié)果表明已建立了能分泌IgE-抑制因子的T細(xì)胞雜交瘤。

Metzger進(jìn)行了在IgF受體受到刺激后生物學(xué)方面的研究，發(fā)現(xiàn)一經(jīng)改變了的抗體會(huì)使受體發(fā)生反應(yīng)，而無須IgE的參與。

T.Ishizaka討論了受體的搭橋及搭橋后膜止酶的活化。她的研究是鑒定與膜相關(guān)的那一個(gè)酶在Ca++涌入中所起的重要作用。用人的細(xì)胞進(jìn)行此項(xiàng)工作受到細(xì)胞來源的限制。過去幾年曾積極從事于建立人的嗜堿細(xì)胞和肥大細(xì)胞的體外培養(yǎng)，最近已能成功地培養(yǎng)人嗜堿細(xì)胞，使臍血的單個(gè)核細(xì)胞中的嗜堿細(xì)胞能選擇性的生長。此項(xiàng)工作的要點(diǎn)是在全血培養(yǎng)中加入已除去IL-2的T細(xì)胞培養(yǎng)上清，經(jīng)2-4周培養(yǎng)后有50-90%的細(xì)胞具有嗜堿細(xì)胞和肥大細(xì)胞的特點(diǎn)，但光學(xué)顯微鏡不能區(qū)分其為哪一種細(xì)胞，后經(jīng)電鏡觀察證實(shí)為嗜堿細(xì)胞，因之稱其為經(jīng)過培養(yǎng)的嗜堿細(xì)胞。其表面標(biāo)志為OKT3-、OKM1-、Thy1-，組胺含量為每100萬細(xì)胞介于0.5-2.0r之間，每個(gè)細(xì)胞上約有12-38萬IgE受體。此細(xì)胞與人IgE有高度親和力，經(jīng)人IgE致敏后用抗人IgE攻擊可釋放相當(dāng)量的組胺。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)此培養(yǎng)的嗜堿細(xì)胞不僅與人IgE結(jié)合，而且也可與小鼠和大鼠的單克隆IgE結(jié)合。小鼠IgE和人IgE結(jié)合到培養(yǎng)的人嗜堿細(xì)胞上的速率相似，只是小鼠IgE解離的速率較快。關(guān)于介質(zhì)釋放的啟動(dòng)機(jī)理仍有許多問題有待解決。但他相信有了大量有功能的可培養(yǎng)的嗜堿細(xì)胞，為進(jìn)一步分析Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病所涉及的介質(zhì)釋放提供了一個(gè)有力工具。

Austen主要介紹最近幾年對(duì)肥大細(xì)胞的新認(rèn)識(shí)。已發(fā)現(xiàn)一個(gè)亞群的肥大細(xì)胞與一般含有肝素的結(jié)締組織肥大細(xì)胞明顯不同，它是受T細(xì)胞控制的。此第二類肥大細(xì)胞有產(chǎn)生白細(xì)胞三烯的獨(dú)特能力，可能與粘膜上的肥大細(xì)胞是一致的。Austen將此類細(xì)胞稱為E-肥大細(xì)胞，而將含肝素的稱為H-肥大細(xì)胞。他發(fā)現(xiàn)，小鼠骨髓細(xì)胞在TH因子的控制下生成的肥大細(xì)胞在電鏡下與一般的肥大細(xì)胞無差別。最近的研究是得知為維持此細(xì)胞或使此細(xì)胞分化增殖均需有IL-3（TH產(chǎn)生、分子量介于23000-29000的糖蛋白、等電點(diǎn)中性、活性很強(qiáng)、少量可使細(xì)胞分化），在小鼠骨髓細(xì)胞的培養(yǎng)中加入IL-3，于不同時(shí)間進(jìn)行檢查證實(shí)，8周后100%的細(xì)胞均具有IgE受體。

Austen還用同位素標(biāo)記LTC4（白細(xì)胞三烯C4）檢測(cè)證明，平滑肌上有LTC4的受體。由于了解到有第二類肥大細(xì)胞的存在以及對(duì)肥大細(xì)胞生物學(xué)的研究，使對(duì)速發(fā)型超敏反應(yīng)的理解又前進(jìn)一步。

3．X-連鎖免疫缺陷：CBA/N小鼠有X-連鎖免疫缺陷（X-linked　Immune　Defect），血清IgE水平很低，對(duì)某些抗原缺乏反應(yīng)，如對(duì)胸腺信賴性（Thymus　Dependent:TD）抗原的IgE和IgG缺乏應(yīng)答性等。CBA/N小鼠這種X-連鎖對(duì)多糖抗原反應(yīng)缺陷具有重要意義，可以選用CBA/N來研究人的X-連鎖缺陷病（如Bruton氏丙種球蛋白缺乏癥、Wiskott-Aldrich氏綜合癥等）。因此CBA/N小鼠是研究X-染色體對(duì)免疫功能的影響和B細(xì)胞的發(fā)生、功能、異質(zhì)性的極好動(dòng)物模型。

4．過敏癥：LEW大鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)過敏性腦脊髓炎敏感，極易感染誘發(fā)性自家免疫性心肌炎，對(duì)誘發(fā)自家免疫性復(fù)合性腎小球腎炎敏感。易感染實(shí)驗(yàn)過敏性腦炎和藥理誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎。AS大鼠易感染實(shí)驗(yàn)過敏性腦脊髓炎，對(duì)自家免疫性腎小球炎敏感。AUG大鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)過敏性腦脊髓炎易感，對(duì)自家免疫性甲狀腺炎有抗力。WAG大鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)過敏性腦脊髓炎有抗力，有些大鼠攜帶防御右旋糖苷過敏反應(yīng)的隱性基因dx,對(duì)誘發(fā)自家免疫甲狀腺炎敏感。

人類的一些自身免疫病的動(dòng)物模型可參看表10-7。

表10-7　人類自身免疫性疾病的動(dòng)物模型

疾　病可能的抗原動(dòng)　物　模　型自身免疫性溶血性貧血
特發(fā)性血小板減少性紫癜Rh、I、i、P
血小板膜用李斯特單核細(xì)胞增多癥菌免疫家兔、NZB小鼠、狗。感染性腦脊髓炎
外周神經(jīng)炎中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦磷脂
外周神經(jīng)髓磷脂實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎
實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性神經(jīng)炎腎小球腎炎腎小球基底膜，可能與鏈球菌抗原發(fā)生交叉反應(yīng)基底膜+福氏佐劑可引起羊腎炎、馬杉腎炎淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎甲狀腺球蛋白微粒體抗原，第2膠質(zhì)抗原肥雞的甲狀腺炎
變態(tài)反應(yīng)性甲狀腺炎肝斗性肝硬化
潰瘍性結(jié)腸炎線粒體、膽管上皮細(xì)胞
結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞用家兔抗線粒體抗體可造成大鼠的肝膽系統(tǒng)損傷。
用結(jié)腸上皮細(xì)胞或腸道上皮細(xì)胞免疫家兔及大鼠交感性眼炎
水晶體葡萄膜炎
天瘡瘡
重癥肌無力
部分男性不育癥葡萄膜抗原（色素？）
水晶體蛋白
皮膚的復(fù)層磷狀上皮細(xì)胞間橋抗原
橫紋肌
精子同種葡萄膜組織加佐劑引起豚鼠發(fā)生本病。
在多種動(dòng)物可造成變應(yīng)性葡萄膜炎。
家兔模型
用肌肉抗原與2-硝酸復(fù)合物免疫家兔
實(shí)驗(yàn)性自身免疫性無精子生成癥

（四）其他免疫性疾病

BUF大鼠：36周齡的雄鼠有自家免疫性甲狀腺炎，大于一年齡的動(dòng)物有26%發(fā)生自發(fā)性自家免疫性甲狀腺炎和甲狀腺單核細(xì)胞浸潤。食入3-甲基五環(huán)碳氯化合物后能自發(fā)地發(fā)生自家免疫性甲狀腺炎，而新生期胸腺切除后其發(fā)生率幾乎達(dá)到100%，對(duì)綿羊紅細(xì)胞缺乏免疫反應(yīng)。

DA大鼠易患自家免疫性甲狀腺炎。

PVG大鼠對(duì)誘發(fā)免疫性甲狀腺炎有抗力。易感染溶組織阿米巴病。WAG大鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)過敏性腦脊髓炎有抗力。有些動(dòng)物可能攜帶防御右旋糖苷過敏反應(yīng)的隱性基因dx，對(duì)誘發(fā)自家免疫性甲狀腺炎敏感。對(duì)鐵缺乏敏感，且多肽類（TG）-Pro-L繼發(fā)性抗體反應(yīng)性低。